中国北方汉族人群PHN发病与HLA-A等位基因相关性研究

摘要

目的：
　　人类白细胞抗原(HLA)基因位于人类第6号染色体短臂上（6P21.3区），是人类基因组中最复杂、最具有多态性的遗传系统。在抗原识别、递呈、机体免疫应答与调控等方面有着极其重要的作用，HLA基因分型已广泛应用于组织配型，器官移植、疾病相关性研究等领域。HLA共有3类抗原，HLAⅠ类抗原区包括HLA-A、B、C、D、E等位点，HLAⅡ类抗原区主要包括DR、DQ和DP三个亚区，还有其他若干个基因位点，其基因序列非常复杂。HLA基因多态性与疾病相关性的研究一直以来都是遗传学的研究热点。
　　带状疱疹后神经痛(postherpetic neuralgia，PHN)是指带状疱疹的皮损愈合后仍然存在的疼痛，其具有较高的发病率，严重影响了患者的生活质量。国外曾有关于HLA基因多态性与PHN的相关研究，国内尚无报道。本研究旨在探讨中国北方汉族人群中带状疱疹后神经痛(PHN)的发病与人类白细胞抗原(HLA)的相关性。
　　方法：
　　一、对象
　　实验组共收集北方汉族带状疱疹后神经痛患者42例，男19例，女23例，年龄56-84岁，平均年龄71.2岁，籍贯为中国辽宁省、吉林省、内蒙古省，均属于中国北方，全部为汉族，彼此无血缘关系。病程均大于3个月，VAS评分≥4分。
　　对照组为来自中国医科大学附属第一医院体检中心健康人100例，男58例，女42例，平均年龄51.6岁。皆为中国北方汉族，彼此无血缘关系。
　　二、主要试剂和仪器
　　全血DNA提取试剂盒（QIAGEN公司），HLA-A扩增引物、测序引物(Promega公司)，台式高速离心机，PCR扩增仪，DNA测序仪。
　　三、实验方法
　　1、血液采集:肘静脉采血2ml，EDTA抗凝。
　　2、DNA提取:应用全血基因组DNA提取试剂盒（QIAGEN公司）提取基因组DNA。所有操作在室温下进行。
　　3、PCR扩增:反应体系50ul，反应条件:95℃预变性2min;95℃变性45s，65℃退火45s，72℃延伸50s，共30个循环;72℃延伸5min。
　　4、PCR-SBT:以PCR扩增引物作为测序引物，进行直接测序分型。
　　四、统计学处理
　　所有测序结果经Geneious9.1.2软件分析比对，得出等位基因型，采用直接计数法计算各等位基因频率。Hardy-Weinberg平衡检验使用卡方检验。患者组与对照组基因频率比较使用SPSS(Version11.5)软件进行卡方检验，1≤样本量＜5时，采用Fisher校正检验，并计算相对危险度(OR)。
　　结果：
　　本研究中检测出17种HLA-A等位基因型，经卡方检验计算，符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。PHN患者中的HLA-A*2601、-A*3004、-A*3303的基因频率明显高于健康人组(P＜0.05)。而PHN患者中HLA-A*0201的基因频率明显低于健康人组(P＜0.05)。
　　结论：
　　HLA-A*2601、-A*3004、-A*3303、-A*0201与中国北方汉族人群PHN发病相关，其中HLA-A*2601、-A*3004、-A*3303为PHN发病的易感基因，而HLA-A*0201为其保护性基因。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

材料与方法

一、研究对象

二、主要试剂和仪器

三、实验方法

四、统计学处理

实验结果

讨论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 带状疱疹后遗神经痛的发病机制及治疗方式的探讨

在学期间科研成绩

致谢

个人简历