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引言
1木质纤维素的综合利用
1.1背景介绍
1.2木质纤维素
1.2.1木质纤维素组成
1.2.2木质纤维素水解预处理
1.3发酵木糖菌株
1.3.1自然界中的木糖发酵菌
1.3.2木糖代谢工程菌
1.4原生质体融合技术(Protoplast fusion)
1.4.1原生质体融合技术的研究进展
1.4.2原生质体融合技术的原理
1.4.3原生质体的灭活技术
1.4.4原生质体融合的应用
1.5基因组改组(Genome shuffling)
1.5.1 DNA改组技术
1.5.2基因组改组
1.6本论文研究的目标
2实验材料及方法
2.1材料与方法
2.1.1菌种
2.1.2培养基
2.1.3试剂
2.1.4培养方法
2.2仪器与分析方法
2.2.1仪器
2.2.2分析方法
2.3菌种考察
2.3.1木糖培养状况
2.3.2同化碳源能力
2.3.3耐高糖、高温能力
2.3.4乙醇冲击
2.3.5木糖发酵测定
2.4休哈塔假丝酵母与酿酒酵母的原生质体融合
2.4.1乙醇驯化
2.4.2呼吸缺陷型筛选
2.4.3原生质体的制备
2.4.4融合方法
2.5融合子生理生化特征分析
2.5.1融合子细胞形态及大小鉴定
2.5.2融合子DNA含量及倍数的鉴定
2.6融合子发酵测定
2.6.1融合子产气实验
2.6.2融合子发酵测定
2.6.3混合糖发酵
2.7基因组改组
2.7.1突变体文库的构建
2.7.2基因组改组策略
3木糖发酵菌的菌种选择
3.1引言
3.2实验材料与方法
3.2.1菌种
3.2.2培养基
3.2.3培养方法
3.2.4分析方法
3.3结果与讨论
3.3.1生长曲线
3.3.2同化碳源实验
3.3.3高渗高温实验
3.3.4乙醇冲击实验
3.3.5发酵实验
3.3.6 1766发酵条件优化
3.4小结
4原生质体融合法构建木糖发酵乙醇优良酵母
4.1引言
4.2材料与方法
4.2.1菌种
4.2.2培养基
4.2.3试剂
4.2.4实验方法
4.3结果与讨论
4.3.1休哈塔假丝酵母改良及发酵性能测定
4.3.2原生质体融合
4.3.3融合子的鉴定与分析
4.3.4融合子与亲本发酵性能的比较
4.4 小结
5休哈塔假丝酵母基因组改组文库的构建
5.1引言
5.2材料与方法
5.2.1菌种
5.2.2培养基
5.2.3紫外诱变
5.2.4耐乙醇冲击酵母筛选
5.2.5耐高温酵母筛选
5.2.6耐高糖酵母筛选
5.2.7耐水解液毒性酵母筛选
5.2.8呼吸缺陷型
5.2.9基因组改组方法
5.3结果与讨论
5.4 小结
结论
创新点与工作展望
创新点
工作展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢