苦瓜藤中三萜类化合物的分离

摘要

苦瓜中的三萜苷元和三萜皂苷是苦瓜的有效成分，国内外研究表明，苦瓜中的三萜类物质具有改善胰岛素抵抗、降血糖、提高免疫力等作用。本论文以苦瓜藤为研究对象，以分离纯化三萜类化合物为研究目标，最终建立一种快速大量制备三萜类化合物的方法。
　　本文首先利用正/反相硅胶柱层析色谱、MCI柱层析色谱、制备液相色谱等方法从苦瓜藤75％乙醇-水提取物中分离纯化并鉴定出6种三萜类化合物，分别是3,7,25-Trihydroxycucurbita-5,23-dien-19-al(化合物1)、momordicines I(化合物2)、葫芦烷-5，23-二烯-3β，7，25-三羟基-9-醛基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖甙(3)、MomordicineIV(4)、MomordicineII(5)、3,7-二羟基-23(R)-乙氧基-19-醛基-5,24-二烯醇(6)。
　　然后通过静态吸附和解吸附试验，对7种大孔树脂富集化合物1和化合物2的能力进行比较，筛选出能有效富集两种化合物的树脂HPD200A，并进一步研究了HPD200A树脂富集两种化合物的机理，结果表明化合物1和化合物2在HPD200A树脂上的吸附机理符合拟一阶吸附动力学模型。同时，韦伯-莫里斯模型表明化合物1和化合物2在HPD200A树脂上的吸附速率可能是由膜扩散和粒子内部扩散等方式决定。其次，通过研究苦瓜藤提取液中化合物1和化合物2在HPD200A树脂上的动态吸附和解吸附特性，确定了最优上样条件为：上样液中化合物浓度分别为0.068mg/ml，0.091mg/ml；上样液流速为3.5ml/min；上样液体积为树脂体积的3倍。最优洗脱条件依次为：蒸馏水（3倍树脂体积），60%乙醇-水溶液（4倍树脂体积），85%乙醇-水溶液（8倍树脂体积）。在此洗脱条件下，经过HPD200A树脂柱层析，制备的粗品杂质大量减少，化合物1和化合物2的含量分别从1.19%和1.60%增加到19.44%和21.91%。粗品经过制备液相纯化，得到5.3mg化合物1和7.1mg化合物2，经液相检测纯度均达到85%以上。

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第一章 文献综述

1.1 概述

1.2 苦瓜中化学成分研究

1.2.1 三萜类化合物

1.2.2 多糖

1.2.3 蛋白、多肽类

1.3三萜类化合物的药理作用

1.3.1 改善胰岛素抵抗和降血糖作用

1.3.2 抗糖尿病和肥胖作用

1.3.3 抗肿瘤抗癌作用

1.3.4 抗菌抑菌作用

1.4三萜类化合物的分离纯化方法

1.4.1 有机溶剂萃取法

1.4.2 超滤法

1.4.3 大孔树脂法

1.4.4 色谱法

1.5 三萜化合物的含量分析与结构鉴定

1.6 本课题的研究内容与意义

1.6.1 主要研究内容

1.6.2 本课题的意义

第二章 苦瓜藤中三萜类化合物的分离纯化

2.1 材料

2.1.1 原料和试剂

2.1.2 仪器和设备

2.2方法

2.2.1 苦瓜藤总三萜类化合物的含量测定

2.2.2 苦瓜藤总三萜类化合物的分离纯化

2.3 结果与分析

2.3.1 苦瓜藤总三萜类化合物的含量测定

2.3.2 定性分析与纯度分析

2.3.3 结构鉴定

2.3.4 本章小结

第三章 大孔树脂富集化合物1和化合物2

3.1 材料

3.1.1 原料和试剂

3.1.2 仪器和设备

3.2 方法

3.2.1 样品的HPLC色谱分析

3.2.2 加样回收率实验

3.2.3样品溶液的制备

3.2.4样品的含量测定

3.2.5 大孔树脂的筛选

3.2.6 纯品的静态吸附

3.2.7 粗提液的动态吸附与解吸附

3.2.8 化合物的制备过程

3.3 结果与讨论

3.3.1 标准曲线

3.3.2化合物1和化合物2的含量

3.3.3 大孔吸附树脂的筛选

3.3.4 静态吸附结果

3.3.5 动态实验结果

3.3.6 样品的含量和纯度

3.4 本章小结

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

致谢

参考文献