富硒女贞子生物学功效初探

摘要

硒(Selenium，Se)元素是机体必需的微量元素之一，具有抗氧化、增强机体免疫调节能力等重要生物学功能。本研究通过女贞树盛花期叶面喷施亚硒酸钠而收获富硒女贞子，并对其生物学功效开展相关研究。主要内容包括:富硒女贞子的制备、营养成分及生物活性成分的测定、富硒女贞子安全性试验、富硒女贞子对杂交瘤细胞的生长及动物免疫功能的影响。
　　 试验一富硒女贞子的生产及矿物元素测定2009年6月女贞树盛花期通过叶面喷洒1000、500、100mg/L亚硒酸钠水溶液，阴性对照组喷洒等量自来水，每组喷施6颗，一周后重喷1次，待女贞树自然生长至果熟，于2009年12月采收紫红色饱满果实。经加工处理后，采用ICP-MS、FAAS对富硒女贞子14种矿物元素进行测定。结果显示:女贞叶面喷施亚硒酸钠浓度为1000mg/L时，容易发生落花、黄叶现象;喷施浓度为500mg/L、100mg/L时，其果实硒含量分别达到了0.93、0.43μg/g，极显著高于对照组女贞子中的硒含量0.03μg/g(P＜0.01)，且其他重金属铅、镉等含量均符合国家安全标准。
　　 试验二硒对女贞子营养成分及活性成分的影响通过对富硒女贞子营养成分、矿物元素及其主要活性成分齐墩果酸、熊果酸的含量测定，来观察硒对女贞子营养成分及生物活性成分积累的影响。结果显示:叶面喷施硒肥可以提高女贞子中蛋白质、熊果酸、氨基酸的含量，改变多种矿物质元素的含量比，使硒、锶、锰等人体必需的微量元素显著地增加，常量元素钠含量显著降低。富硒后女贞子中的齐墩果酸含量低于普通女贞子;而对熊果酸含量提高具有一定的正相关性。
　　 试验三富硒女贞子的安全性试验采用最大给药量的方法，观察富硒女贞子1日内给予小鼠灌胃的急性毒性反应。结果测得富硒女贞子最大给药量为80g/kg。然后，分别以5000、2500、1250mg/kg浓度的富硒女贞子大鼠灌胃给药，连续给药90d作亚慢性毒性试验。期间每天观察大鼠临床症状，并于连续给药45d和90d测定大鼠的血液生理、血清生化指标以及心、肝、脾、肺、肾、胃肠等组织器官的变化。试验结果显示:各试验组大鼠的各项指标均在正常范围内，与对照组相比无显著差异。表明在试验条件下，富硒女贞子无急性毒性和亚慢性毒性反应。
　　 试验四富硒女贞子对杂交瘤细胞增殖的影响采用MTT法测定富硒女贞子水提和醇提取物、女贞子水提和醇提取物对瘤细胞生长的安全浓度，并测定了在安全浓度下12、24、36、48h时间点各药物对杂交瘤细胞增殖的影响。结果显示:富硒女贞子和女贞子的水提取物、醇提取物分别在200、400μg/mL浓度下对瘤细胞没有明显的毒性。富硒女贞子水提物在20～200μg/mL范围内在12h时各浓度对杂交瘤细胞的增殖活性均有促进作用，且显著高于对照组，亦普遍优于女贞子水提物相应各浓度的作用效果。富硒女贞子醇提物在20～400μg/mL各浓度作用24、36h对杂交瘤细胞增殖的促进作用亦优于女贞子醇提物组，表明富硒女贞子水提取物和醇提取物均具有促进杂交瘤细胞增殖而提高特异性免疫的作用，且其效果优于女贞子组。
　　 试验五富硒女贞子对鸡抗氧化和免疫功能的影响选取14日龄雏鸡108只，随机分成3组，每组3个重复，每个重复12只鸡。分别给予0.4％浓度的富硒女贞子和女贞子水提液混饮;对照组正常饮水，饲喂基础日粮。于7、21日龄分别用鸡新城疫低毒力活疫苗(LaSota株)滴鼻、点眼免疫，并分别于21、28、35、42日龄测定鸡新城疫抗体效价和血清中白细胞介素-2水平;42日龄测定免疫器官指数与血浆和组织中GSH-Px、SOD和MDA的含量。结果显示:富硒女贞子可显著提高鸡脾脏指数和白细胞介素-2水平;显著提高肾脏中SOD的酶活性;显著降低鸡血浆和组织中MDA的含量。说明在饮水中添加0.4％浓度富硒女贞子对鸡抗氧化和非特异性免疫功能有良好的促进作用。与普通女贞子相比富硒女贞子的作用更为显著。

目录

摘要

符号说明

文献综述

1 女贞子植物生物学研究进展

1．1 女贞子药材的原植物

1．2 女贞子药材特性

1．3 女贞子药材植物形态与生物学特性

1．4 女贞子植物主要生物活性成分

1．5 女贞子植物药理作用

2 微量元素硒研究进展

2．1 硒的生物学功能

2．2 植物富硒的研究进展

2．3 植物有机硒的应用

3 小结

参考文献：

试验一 富硒女贞子的生产及矿物元素测定

1 材料与方法

1．1 试剂

1．2 仪器

1．3 富硒女贞子的生产

1．4 女贞子的加工

1．5 样品处理方法

2 结果与分析

2．1 富硒女贞子中微量元素的测定结果

3 讨论

参考文献：

试验二 硒对女贞子营养成分及活性成分的影响

1 材料与方法

1．1 样品

1．2 主要试剂与仪器

1．3 营养成分测定方法

1．4 富硒女贞子和女贞子中齐墩果酸和熊果酸含量的对比

2 结果与分析

2．1 硒对女贞子中营养成分的影响

2．2 硒对女贞子中齐墩果酸和熊果酸含量的影响

2．3 硒对女贞子中矿物质元素含量的影响

2．4 硒对女贞子中氨基酸含量的影响

3 讨论

参考文献：

试验三 富硒女贞子的安全性评价

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 急性毒性试验

1．3 亚慢性毒性试验

2 结果

2．1 急性毒性试验结果

2．2 亚慢性毒性试验结果

3 讨论

3．1 急性毒性试验

3．2 亚慢性毒性试验

参考文献：

试验四 富硒女贞子对杂交瘤细胞增殖的影响

1 材料与方法

1．1 试验药物

1．2 主要试剂

1．3 主要仪器

1．4 试验细胞株

1．5 试验方法

1．6 数据分析

2 结果与分析

2．1 富硒女贞子和女贞子水提物对瘤细胞的毒性

2．2 富硒女贞子和女贞子醇提物对瘤细胞的毒性

2．3 富硒女贞子和女贞子水提物、醇提物对杂交瘤细胞的作用

3 讨论

参考文献：

试验五 富硒女贞子对鸡抗氧化及免疫功能的影响

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验仪器

1．3 试验动物

1．4 方法

1．5 数据分析

2 结果与分析

2．1 富硒女贞子和女贞子水提液中硒含量结果

2．2 鸡新城疫抗体效价测定结果

2．3 富硒女贞子对鸡血清白介素-2含量的影响

2．4 富硒女贞子对鸡免疫器官指数的影响

2．5 富硒女贞子对鸡抗氧化功能的影响

3 讨论

3．1 饮水中添加富硒女贞子对鸡免疫功能的影响

3．2 富硒女贞子对鸡组织中GSH-Px、SOD活性的影晌

3．3 富硒女贞子对鸡组织中MDA含量的影响

4 结论

参考文献：

全文结论

硕士期间发表论文情况

致谢

附录

声明