摘要
符号说明
第一章 文献综述
1 内源性大麻素系统概况
2 大麻素受体的研究进展
3 大麻素受体的组织分布
4 大麻素受体的结构与功能的研究
5 大麻素受体的信号调节过程
5．1 外界因素对大麻素受体的调节
5．2 大麻素受体参与的细胞内调节
6 与CNR1有关的能量平衡机制
7 与CNR2有关的免疫调控机制
8 大麻素受体基因的结构
9 大麻素受体的研究现状
9．1 人大麻素受体的研究现状
9．2 其它动物大麻素受体的研究现状
10 本研究目的意义
第二章 猪和牛大麻素受体基因克隆及其在HEK293T细胞中的表达
1 试验材料
1．1 主要仪器设备
1．2 主要试剂
2 试验方法
2．1 pCNR1，cCNR1和cCNR2基因的克隆
2．2 TA克隆
2．3 真核表达载体的构建
2．4 真核表达载体的大量提取
2．5 真核表达载体转染HEK293T细胞
2．6 蛋白免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达
3 结果与分析
3．1 PCR扩增结果
3．2 TA克隆酶切鉴定结果
3．3 真核表达载体双酶切鉴定结果
3．4 双酶切产物测序结果
3．5 加Kozak序列和myc标签序列的基因测序结果
3．6 Western blot检测目的蛋白的表达
4 讨论
4．1 基因克隆
4．2 TA克隆的目的
4．3 pcDNA3．1(+)真核表达载体的选择
4．4 Kozak序列和myc分子标签序列
4．5 Western blot检测目的蛋白的表达
5 小结
第三章 猪和牛大麻素受体的配体对cAMP信号通路的影响
1 试验材料
1．1 主要仪器设备
1．2 主要试剂
2 试验方法
2．1 检测不同配体对受体细胞内cAMP水平的影响
2．2 激动剂与反向激动剂配制浓度与方法
2．3 不同配体作用于HEK293T细胞
2．4 微孔板多功能检测仪检测配体对HEK293T细胞内cAMP水平的影响
2．5 数据分析
3 结果与分析
3．1 检测配体对HEK293T细胞内cAMP水平的影响
4 讨论
4．1 荧光素酶报告基因质粒pGL4．29[luc2P／CRE／Hygro]的选择
4．2 脂质体法转染HEK293T细胞
4．3 不同配体对HEK293T细胞内cAMP信号通路的影响
5 小结
全文总结
致谢
参考文献
在读期间发表文章
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