阿托伐他汀联合塞来昔布对人结肠癌SW-480细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的：探讨羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂阿托伐他汀(Atorvastatin)联合选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对人结肠癌SW-480细胞增殖和凋亡的影响，并初步探讨其可能的作用机制，为结肠癌的药物治疗提供依据。
　　 方法：(1)将Atorvastatin和Celecoxib单独及联合作用于结肠癌细胞系SW-480细胞，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吸光度值，计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率。(2)应用流式细胞仪(FCM)研究Atorvastatin对结肠癌SW-480细胞周期的作用；Atorvastatin和Celecoxib及联合药物组对结肠癌SW-480细胞凋亡作用，计算细胞凋亡率；倒置显微镜观察细胞形态学变化。(3)RT-PCR法检测单药组及联合药物组作用于结肠癌SW-480细胞后bcl-2、bax及MMP9表达水平的变化(4)WesternBlot法检测bcl-2、bax及MMP9在蛋白水平的表达。
　　 结果：(1)MTT法显示Atorvastatin组，Celecoxib组及联合用药组均可抑制SW-480细胞的生长，呈时间和剂量依赖性，对照组及各实验组之间差别均有统计学意义(p<0.05)，联合药物组抑制呈协同作用(Q>1.15)。(2)流式细胞术检测后显示①SW-480细胞经Atorvastatin作用48小时后可见细胞周期S期明显抑制，且随着浓度的增加SW-480细胞周期G0/G1期比例增加，S期细胞比例下降，具有统计学意义(p<0.05)。②Atorvastatin组，Celecoxib组及联合药物组作用48小时后，均能有效诱导SW-480细胞凋亡，且在上述各浓度联合应用时具有协同效应。(3)RT-PCR检测表明：Atorvastatin组和联合药物组作用48h后bcl-2、MMP9的mRNA表达明显下降，而bax的mRNA表达升高(p<0.05)。(4)Western Blot法结果显示Atorvastatin组和联合药物组作用48h后，细胞中的bcl-2、MMP9蛋白表达下降，而bax蛋白表达升高(p<0.05)。
　　 结论：(1)Atorvastatin能抑制体外培养的人结肠癌SW-480细胞生长，并呈时间和剂量依赖性；Atorvastatin能使细胞发生凋亡并使细胞周期阻滞于G0/G1期。(2)Atorvastatin对SW-480细胞生长抑制和诱导凋亡作用可能与下调bcl-2、MMP9及上调bax有关。(3)Atorvastatin与Celecoxib联合应用后，具有协同抑瘤作用。