PPARα激动剂非诺贝特对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及机制研究

摘要

目的:胰腺癌是常见恶性肿瘤。放疗是胰腺癌治疗的重要手段，因而增加胰腺癌细胞的放射敏感性具有重要意义。非诺贝特（fenofibrate）是PPARα的特异性激动剂。本研究拟探讨PPARα在胰腺癌中的表达，PPARα激动剂非诺贝特联合X射线对人胰腺癌PANC1细胞、Patu8988细胞生长和放射敏感性的影响及机制研究。
　　方法:通过免疫组化法检测80例胰腺癌及癌旁组织中PPARα的差异表达，并观察其与胰腺癌患者年龄、性别、TNM分期的关系。通过 MTT检测非诺贝特联合 X射线对人胰腺癌PANC1细胞、Patu8988细胞生长的影响；平板克隆形成实验检测检测非诺贝特联合X射线对人胰腺癌PANC1细胞、Patu8988细胞克隆形成的影响；通过划痕实验检测非诺贝特和X射线联合作用对PANC1细胞和Patu8988细胞迁移的影响；通过Transwell细胞侵袭实验检测非诺贝特和X射线联合作用对PANC1细胞和Patu8988细胞侵袭能力的影响；通过裸鼠皮下建立人胰腺癌PANC1移植瘤模型，检测非诺贝特和 X射线联合作用对裸鼠移植瘤生长的影响；通过免疫荧光法检测非诺贝特对PANC1细胞PPARα表达的影响；通过表达谱芯片筛选非诺贝特联合X射线照射后PANC1细胞差异表达的mRNA；通过MTT检测ZnCl2、TPEN对人胰腺癌细胞株 PANC1生长的影响；通过锌离子探针方法观察非诺贝特和 X射线联合作用对PANC1细胞锌离子的影响；通过Western Blot检测非诺贝特对PANC1细胞ZIP7表达的影响；通过免疫组织化学方法分析80例胰腺癌组织和胰腺癌旁组织中ZIP7表达水平。
　　结果: PPARα在胰腺癌组织表达水平高于癌旁组织（P<0.01），胰腺癌组织中PPARα蛋白表达水平与TNM分期有关（P<0.01）,与年龄、性别无关；非诺贝特能够增强X射线对人胰腺癌PANC1细胞和Patu8988细胞生长、克隆形成、迁移、侵袭以及裸鼠PANC1移植瘤生长的抑制；非诺贝特能够促进PPARα在PANC1细胞核表达；非诺贝特联合X射线照射后PANC1细胞差异表达的mRNA包括TAOK2, JAK3, SLC39A7(ZIP7)和TRPV1等2669个；表达的基因影响多个通路。ZnCl2促进PANC1细胞生长，金属螯合剂TPEN能够抑制PANC1细胞生长；非诺贝特和X射线联合作用能够促进PANC1细胞锌离子在细胞内聚集减少；非诺贝特抑制PANC1细胞中ZIP7表达；ZIP7在胰腺癌组织表达水平高于癌旁组织。
　　结论:PPARα胰腺癌组织中高表达，并与临床病理特征和生存期相关。PPARα激动剂非诺贝特能够增强胰腺癌细胞放射敏感性；非诺贝特能直接或间接影响胰腺癌细胞中多个基因表达。非诺贝特可抑制ZIP7表达，降低胰腺癌细胞内锌离子浓度，并促使某些关键蛋白缺锌，从而引起细胞死亡增加，这可能是非诺贝特增加胰腺癌细胞放射敏感性途径之一。

目录

声明

引言

参考文献

第一部分：胰腺癌组织中PPARα的表达及其临床意义

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第二部分：PPARα激动剂非诺贝特对胰腺癌细胞放射敏感性的影响

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第三部分：PPARα激动剂非诺贝特对胰腺癌放射增敏的机制研究

材料

方法

结果

讨论

参考文献

结论

综述：锌和锌铁调控蛋白ZIP与肿瘤关系的研究概况

博士期间发表的论文及参与的科研项目

英文缩略词表

致谢