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第一章绪论
1.1脂肪酶概述
1.1.1脂肪酶的定义
1.1.2脂肪酶的来源
1.1.3微生物脂肪酶的应用
1.2研究背景
1.2.1产脂肪酶微生物的筛选
1.2.2脂肪酶的酶活测定
1.2.3脂肪酶的分离纯化
1.2.4双水相萃取
1.2.5提高微生物脂肪酶产量、活性和稳定性的方法研究
1.2.6钙离子对微生物脂肪酶活性和稳定性的影响
1.2.6钙离子对细菌脂肪酶的折叠分泌的影响
1.3研究目的及内容
第二章产脂肪酶微生物的筛选及鉴定
2.1前言
2.2材料与方法
2.1.1实验仪器和试剂
2.2.2筛选材料
2.2.3培养基
2.2.4产脂肪酶微生物的筛选
2.2.5脂肪酶酶活力的测定
2.2.6菌种鉴定
2.3结果与讨论
2.3.1产脂肪酶微生物的筛选
2.3.2 SYBC Li-2菌株的鉴定
2.4小结
第三章双水相萃取分离纯化Acinetobacter sp.SYBC Li-2脂肪酶
3.1引言
3.2材料与方法
3.2.1实验材料
3.2.2仪器和试剂
3.2.3盐析范围的确定
3.2.4透析和浓缩
3.2.5双水相萃取
3.2.6实验测定双结点曲线
3.2.7脂肪酶酶活力的测定
3.2.8发酵液蛋白含量的测定
3.2.9数据分析
3.2.10脂肪酶同工酶的测定
3.2.11 SDS-PAGE电泳
3.3结果与讨论
3.3.1硫酸铵沉淀
3.3.2双水相萃取体系的确定
3.3.3 PEG分子量对萃取效应的影响
3.3.4 PEG浓度对萃取效应的影响
3.3.5 KH2PO4浓度对萃取效应的影响
3.3.6体系pH对萃取效应的影响
3.3.7 NaCl对萃取效应的影响
3.3.8双水相萃取体系的正交优化
3.3.9 Acinetobacter sp.SYBC Li-2脂肪酶分离纯化结果
3.4小结
第四章钙对Acinetobacter sp.SYBC Li-2脂肪酶酶学性质及发酵产酶的影响
4.1引言
4.2材料与方法
4.2.1实验仪器和试剂
4.2.2培养基
4.2.3实验材料
4.2.4菌体培养及胞外脂肪酶的获得
4.2.5发酵菌体量测定方法
4.2.6脂肪酶酶活力的测定
4.2.7发酵液蛋白含量的测定
4.2.8数据分析
4.3结果与讨论
4.3.1钙对SYBC Li-2脂肪酶活性的影响
4.3.2 SYBC Li-2脂肪酶的热稳定性及钙对它的影响
4.3.3 SYBC Li-2脂肪酶的pH稳定性及钙对它的影响
4.3.4 SYBC Li-2菌体的生长曲线和产酶曲线
4.3.5钙对SYBC Li-2发酵产脂肪酶的影响
4.4小结
结论和展望
致谢
参考文献
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文