肌球蛋白轻链激酶基因在小鼠内毛细胞特异性敲除导致听力损失和膜张力下降的相关研究

摘要

听觉的产生离不开一系列细胞信号转导过程，细胞骨架是这一过程中的重要媒介之一。内耳细胞骨架相关蛋白(以myosinⅡ为代表的一系列细胞骨架相关蛋白)的突变是遗传性耳聋的主要原因之一。肌球蛋白轻链激酶(MLCK，myosin lightchain kinase)能够通过磷酸化Ⅱ型肌球蛋白的轻链及与肌动球蛋白的交互作用来调节细胞骨架。故而我们推断MLCK在听觉信号的转导过程中也起着重要作用，进而对其在内毛细胞中功能及作用机制做了相关研究。本研究中我们应用Cre/LoxP基因遗传突变系统在内毛细胞特异性地敲除了Mlck基因来分析敲除小鼠，其中包括听功能的测定、内耳组织形态学的分析及细胞生物学分析几个方面。MLCK特异性敲除小鼠在短声及短纯音的ABR阈值有不同程度的升高，约5dB至20dB。并且相较对照小鼠，敲除小鼠波幅降低，但波幅比值相当。在体结果显示，敲除小鼠内毛细胞纤毛束旁有许多球形结构，但包括纤毛、表皮板在内的其他细胞结构未见异常。分离出的单个敲除小鼠的内毛细胞对低渗刺激敏感，结果还显示内毛细胞的肌动蛋白减少同时伴随部分内毛细胞肌球蛋白轻链磷酸化水的降低。故而我们推断在内毛细胞MLCK通过轻链磷酸化调节膜结构参与听觉功能的实现。

目录

文摘

英文文摘

缩略词 表

前言

第一部分 文献综述

参考文献

第二部分 肌球蛋白轻链激酶基因在小鼠内毛细胞特异性敲除导致听力损失和膜张力下降的研究

材料与方法

实验结果

讨论分析

参考文献

小结与不足

硕士期间发表论文

硕士期间参与研究课题及相关论文

在读期间参加的学术会议及专业培训

致谢