小麦低聚肽对大鼠氮代谢、胃肠道保护作用的影响及机制研究

摘要

小麦活性肽是植物源食物活性肽，已有的研究显示小麦活性肽具有丰富的生物学功能，如抗氧化、抑制血管紧张素转化酶活性、阿片活性、免疫调节等，然而体内试验的研究较少，所以本文拟探讨小麦低聚肽对大鼠氮代谢和胃肠保护作用的影响以及作用机制。研究主要包括以下四个部分:
　　第一部分:小麦低聚肽对大鼠氮代谢以及胃肠黏膜结构和功能的影响
　　目的:观察灌胃小麦低聚肽对于大鼠氮代谢、胃肠道上皮细胞形态和胃肠道关键消化酶活性的影响。
　　方法:SD大鼠50只，随机分为空白组，低、中、高剂量小麦低聚肽组和小麦蛋白组，每天灌胃1次。分别于第10、20、30d用代谢笼采集大鼠24h粪、尿样品。连续灌胃30d，处死所有大鼠，取血清、胃和小肠黏膜，观察氮代谢指标、血清生化指标、胃肠内表面扫描电镜、胃肠道消化酶活等的变化。
　　结果:灌胃30d后，低剂量小麦低聚肽能显著提高大鼠蛋白质表观消化率、氮沉积、净蛋白质利用率;低、中剂量小麦低聚肽均能显著增加蛋白质生物学价值。低、中、高剂量小麦低聚肽均能显著增加大鼠血清总蛋白含量。低、中剂量小麦低聚肽组大鼠胃肠道上皮细胞较空白对照组饱满、连接紧密，排列整齐有序。低、中剂量小麦低聚肽均能显著上调大鼠胃蛋白酶的活力;低、中、高剂量小麦低聚肽均能显著上调大鼠小肠黏膜氨基肽酶活力;中、高剂量小麦低聚肽均能上调大鼠小肠黏膜Na+-K+-ATP酶活力。
　　结论:一定剂量的小麦低聚肽能提高大鼠对于蛋白质的吸收与利用，其可能的途径是:(1)促进胃肠道上皮细胞的生长;(2)胃蛋白酶、小肠黏膜氨基肽酶、Na+-K+-ATP酶活力的上调。
　　第二部分:小麦低聚肽对非甾体类药物致大鼠肠损伤的保护作用
　　目的:通过非甾体类药物诱导的小肠损伤和氧化应激动物模型，来观察小麦低聚肽对小肠可能的保护作用。
　　方法:不同剂量的小麦低聚肽和小麦蛋白灌胃大鼠30d。大鼠处死前，用非甾体类药物灌胃损伤大鼠小肠2次。取大鼠血清和小肠黏膜组织，观察血清细胞因子、小肠病理切片、小肠黏膜抗氧化酶和阿片受体mRNA表达的变化。
　　结果:小麦低聚肽可以减少小肠水肿和损伤，显著降低了血清中TNF-α含量。非甾体类药物可以显著增加小肠黏膜的氧化应激水平，小麦低聚肽有一定的抗氧化功效。同时小麦低聚肽能上调小肠黏膜中GSH-Px的活力。另外小麦低聚肽可以显著下调mu-阿片受体mRNA的表达。
　　结论:非甾体类药物可以诱导大鼠小肠损伤的模型，小麦低聚肽可能是一个可以有效减少大鼠肠损伤和抗氧化的工具。
　　第三部分:小麦低聚肽对非甾体类药物致大鼠胃损伤的保护作用
　　目的:通过非甾体类药物诱导的胃损伤和氧化应激动物模型，来观察小麦低聚肽可能的保护作用。
　　方法:动物分组同第二部分。取大鼠胃体的相同部位，观察胃体病理切片、胃体组织中抗氧化酶活、iNOS活力、NO含量和阿片受体、iNOS mRNA表达的变化。
　　结果:小麦低聚肽可以减少大鼠胃体上皮细胞变性和损伤，显著降低了胃体的组织中氧化应激水平和NO含量，小麦低聚肽有一定的抗氧化功效。同时小麦低聚肽能显著上调胃体的组织中SOD和GSH-Px的活力，下调iNOS的活力。另外小麦低聚肽可以显著下调mu-阿片受体mRNA的表达。
　　结论:非甾体类药物可以诱导大鼠胃损伤的模型，小麦低聚肽可能是一种有效减少大鼠胃损伤和抗氧化的活性物质。保护途径与其能上调抗氧化应激酶活力，抑制胃体的组织中NO的生成，下调mu-阿片受体mRNA的表达有关。
　　第四部分:小麦低聚肽对吲哚美辛致IEC-6细胞系损伤的保护作用及分子机制
　　目的:前期研究显示小麦低聚肽可以减少非甾体类药物对小肠上皮细胞的损伤，但是分子机制并不清楚。本研究利用吲哚美辛诱导肠上皮细胞氧化应激损伤的模型，观察小麦低聚肽对IEC-6细胞系ERK, NF-κB信号通路的影响。
　　方法:(0，125，500和2000 mg/L)小麦低聚肽预处理IEC-6细胞系24h，90 mg/L吲哚美辛损伤12h后，裂解细胞。观察IEC-6细胞系抗氧化酶活力，MDA含量，p-ERK1/2、NF-κB p65的蛋白表达，COX、iNOS活力，PGE-2、NO含量的变化。
　　结果:小麦低聚肽可以显著上调IEC-6细胞系SOD和GSH-Px活力。2000 mg/L小麦低聚肽可以显著抑制IEC-6细胞系p-ERK1/2、NF-κBp65的表达。小麦低聚肽预处理最终可以显著减少IEC-6细胞中MDA、NO的含量，增加肠上皮细胞PGE-2的合成。
　　结论:小麦低聚肽对于吲哚美辛诱导IEC-6细胞系损伤的保护作用的分子机制可能与其抑制胞内ERK, NF-κB信号通路有关。

目录

声明

摘要

主要缩略词

前言

第一章 小麦低聚肽的组成分析

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第二章 小麦低聚肽对大鼠氮代谢以及胃肠道上皮的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第三章 小麦低聚肽对非甾体类药物致肠损伤的保护作用和机制研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第四章 小麦低聚肽对非甾体类药物致胃损伤的保护作用和机制研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第五章 小麦低聚肽对吲哚美辛诱导IEC-6细胞系损伤的保护作用

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第六章 小麦低聚肽对IEC-6细胞系保护作用的分子机制初探

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

全文总结

致谢

参考文献

文献综述 小麦活性肽研究进展

作者简介