继发性和原发性胶质母细胞瘤临床和分子特征差异性分析

摘要

本文对继发性和原发性胶质母细胞瘤临床和分子特征差异性进行了分析。本研究分为三个部分：
　　第一部分：继发性和原发性胶质母细胞瘤临床预后和分子特征分析。
　　目的：继发性和原发性胶质母细胞瘤有着截然不同的临床发展路径。本研究的目的是分析继发性和原发性胶质母细胞瘤临床特征差异，并进一步基于全转录测序分析继发性和原发性胶质母细胞瘤的内在分子特征差异。
　　方法：共分析34例继发性胶质母细胞瘤和88例原发性胶质母细胞瘤，完成临床信息的长期跟踪随访，进一步分析继发性和原发性胶质母细胞瘤患者的生存差异及发病年龄差异。并通过对上述样本进行全基因转录组测序数据，通过IDH1/2突变鉴定、分子亚型注释以及基因群组富集分析(GSEA)分析，对继发性和原发性胶质母细胞瘤的进行内在分子特征差异性分析。
　　结果：在原发性胶质母细胞瘤中有41％样本为间质型，有15％样本为前神经亚型。然而在继发性胶质母细胞瘤中，间质型和前神经亚型所占比例分别为15％和44％。此外，不论是在继发性胶质母细胞瘤还是原发性胶质母细胞瘤中，IDH1/2突变高度集中在前神经亚型。进一步分析示继发性胶质母细胞瘤较原发性胶质母细胞瘤患者年龄更轻，预后相对较差，并且更多发生在额叶。GSEA提示增殖相关基因群富集于继发性胶质母细胞瘤。
　　结论：基于中国人群阐释了继发性和原发性胶质母细胞瘤临床及分子病理学特征差异，这为更深入地理解脑胶质瘤发生发展进程奠定基础。
　　第二部分：继发性胶质母细胞瘤中TERT启动子突变分析。
　　目的：分析端粒酶逆转录酶(Telomerase Reverse Transcriptase，TERT)启动子突变在继发性胶质母细胞瘤中与患者生存预后的相关性。
　　方法：通过巢式PCR和Sanger测序检测15例继发性胶质母细胞瘤样本中TERT启动子突变状态，分析TERT启动子突变在继发性胶质母细胞瘤中的发生频率，应用Kaplan-Meier生存曲线分析TERT启动子突变与患者无进展生存期和总生存期的关系。
　　结果：有6例继发性胶质母细胞瘤样本(6/15，40％)存在TERT启动子突变，携带TERT启动子突变的胶质母细胞瘤患者较TERT启动子野生型患者有相对更长的总生存期(P=0.0496)，然而差异显著性处于临界状态。此外，TERT启动子突变和胶质母细胞瘤患者无进展生存期关系并不确切(P=0.2489)。
　　结论：TERT启动子突变在继发性胶质母细胞瘤中稳定存在并可作为患者总生存期潜在预测标志物。
　　第三部分：继发性和原发性胶质母细胞瘤中microRNA表达谱差异研究。
　　目的：基于microRNA表达谱对继发性和原发性胶质母细胞瘤的分子特征进行研究。
　　方法：应用Illumina miRNA表达谱芯片检测9例继发性和82例原发性胶质母细胞瘤的miRNA表达水平，通过BRB-Array Tools软件对数据进行分析。8例继发性和35例原发性胶质母细胞瘤样品用于实时荧光定量RT-PCR独立验证。
　　结果：基因差异显著性分析示在继发性和原发性胶质母细胞瘤间存在64例显著差异miRNA(FDR＜0.01)，其中38个miRNA在继发性胶质母细胞瘤中低表达，26个miRNA高表达。其中在继发性胶质母细胞瘤高表达的miR-619进一步在独立样本中通过荧光定量RT-PCR进行验证。
　　结论：基于中国人群发现了系列继发性和原发性胶质母细胞瘤差异miRNA，为深入理解继发性和原发性胶质母细胞瘤内在差异分子机制奠定了基础。

目录

声明

英文缩略词

摘要

前言

第一部分 继发性和原发性胶质母细胞瘤临床预后和分子特征分析

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 TERT启动子突变与继发性胶质母细胞瘤患者生存预后的相关性分析

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分 继发性和原发性胶质母细胞瘤中microRNA表达谱差异研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述一

综述二

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致谢