姜黄素对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖和凋亡影响的实验研究

摘要

目的：研究姜黄素对体外培养绒癌JEG-3细胞的生长及细胞中survivin转录水平的影响,探讨姜黄素在JEG-3细胞增殖和凋亡发生中的作用机制及其在绒癌治疗中的临床应用前景。
　　 方法：以体外培养的JEG-3细胞为研究对象,用不同浓度梯度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)的姜黄素处理作为实验组,不含姜黄素的培养液处理的细胞为阴性对照组。用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测24、48和72小时后各组细胞活性,用mnnexin V FITC/PI双染流式细胞术及RT-PCR分别检测20μmol/L、40μmol/L及80μmol/L姜黄素作用48h后细胞的凋亡发生率及survivin转录水平情况。
　　 结果：1.姜黄素对JEG-3细胞的生长具有抑制作用,并有浓度和时间的依赖性:同样的作用时间下,各浓度姜黄素处理组之间以及与对照组比较差异均有统计学意义(p＜0.05),且抑制作用随着姜黄素浓度的增加而明显增加(r=0.913,p＜0.05)；姜黄素达一定浓度时(浓度≥10μmol/L),其对JEG-3细胞的抑制作用随着作用时间的延长而明显加强(r=0.751,p＜0.05)；姜黄素对JEG-3细胞作用24、48和72小时的IC50分别为87.96μmol/L、37.30μmol/L和24.99μmol/L。
　　 2.姜黄素诱导JEG-3细胞凋亡,早期凋亡率随浓度增大而增3n(r=0.966,p＜0.05):分别以0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的姜黄素对JEG-3细胞作用48h后,早期凋亡率依次为:(0.83±0.79)％、(10.54±2.84)％、(22.38±6.99)％、(42.65±6.71)％,各组间相比差异均有统计学意义(p＜0.05)。
　　 3.姜黄素作用后survivin基因表达减少,随浓度增加而减少(r=-0.900,p＜0.05):分别以0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的姜黄素对JEG-3细胞作用48h后,survivin mRNA相对表达水平依次为:0.8032±0.0380、0.4057±0.0206、0.3129±0.0371、0.1623±0.0257,各组间相比差异均有统计学意义(p＜0.05)。
　　 结论：姜黄素对JEG-3细胞有增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与降低survivin表达水平有关。

目录

文摘

英文文摘

缩略词

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 研究对象

2.1.2 主要仪器设备

2.1.3 实验试剂

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养

2.2.2 实验分组

2.2.3 MTT法检测细胞生长抑制率

2.2.4 Annexin V FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率

2.2.5 RT-PCR检测各组细胞中survivin mRNA的表达

2.3 统计学分析

第三章 结果

3.1 姜黄素对JEG-3细胞增殖的影响

3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡率

3.3 姜黄素对survivin mRNA表达的影响

第四章 讨论

4.1 姜黄素对JEG-3细胞体外增殖的影响

4.2 姜黄素对JEG-3细胞凋亡的影响

4.3 姜黄素对JEG-3细胞survivin mRNA表达的影响

第五章 结论

参考文献

综述 姜黄素在妇科肿瘤中的研究进展

致谢