姜黄素对肺纤维化鼠细胞凋亡及Fas/Bcl-2表达的影响

摘要

目的：观察姜黄素对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡及Fas及Bcl-2基因的表达的影响，探讨姜黄素治疗肺纤维化的分子生物学机制，为姜黄素的临床应用提供理论依据。 方法：选取SD大鼠96只，随机分为空白对照组、模型对照组、醋酸泼尼松龙组、姜黄素处理组、每组各24只。除空白对照组外其余各组大鼠气管内1次性滴注盐酸博莱霉素诱导肺纤维化，空白对照组大鼠气管内1次性滴注等体积的生理盐水。造模后第1天开始给药，持续到处死动物的前1天。姜黄素100mg/kg，醋酸泼尼松组每天为0.56 mg/kg，空白和模型对照组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7、14、28天随机处死8只，取肺组织采用TUNEL法、RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织细胞凋亡、Fas/Bcl-2 mRNA以及蛋白的表达，观察姜黄素对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/Bcl-2基因的表达的影响。 结果： 1.肺纤维化模型复制成功；同时间段模型对照组肺组织细胞凋亡指数，Fas mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组(P<0.01)。Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.01)。 2.模型组细胞凋亡从7天开始逐步升高，第28天达最高峰，Fas蛋白与Fas mRNA表达趋势与细胞凋亡同，Fas mRNA与细胞凋亡指数呈正相关关系(r=0.8275，t=7.9375，P<0.01)；模型对照组Bcl-2蛋白与Bcl-2mRNA表达在第7天开始下降，第14天达最低峰，第28天略有回升，但仍低于空白对照组。Bcl-2 mRNA与细胞凋亡指数成负相关(r=-0.6338，t=-4.489，P<0.01)；Bcl-2与Fas无明显相关性(r=-0.3869，t=2.2986，P>0.05)。 3.姜黄素组与模型对照组比较，姜黄素组肺组织细胞凋亡指数及Fas mRNA和蛋白表达低于模型组，高于空白对照组。Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著高于模型对照组及空白对照组。均有统计学意义(P<0.01)；姜黄素组与泼尼松龙组比较7天，14天均无明显统计学意义(P>0.05)，28天姜黄素组细胞凋亡指数和Fas表达低于泼尼松龙组，Bcl-2表达高于泼尼松龙组，有统计学意义(P<0.01)。 结论： 1.肺泡及支气管上皮细胞凋亡与肺纤维化的形成有关，可能是肺纤维化的发病机制之一。 2.Fas mRNA及蛋白表达上调和Bcl-2 mRNA及蛋白表达下调，可能引起肺上皮细胞的凋亡从而导致肺纤维化增生。 3.在博来霉素诱导肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预能减轻肺纤维化的程度。