电离辐射促HA纳米载体介导的hGM-CSF基因在人肝癌HepG2细胞中的转移及表达

摘要

目的:观察电离辐射对羟基磷灰石纳米颗粒介导的质粒pORF-hGM-CSF基因转染的影响并探索出能提高羟基磷灰石转染效率的方法。
　　方法:转染细胞前,依据不同辐射剂量下的HepG2细胞剂量-存活曲线选出2,4,6 Gy不同剂量分组照射。72小时后RT-PCR检测HepG2细胞内hGM-CSF的mRNA表达水平以比较转染效率。
　　结果:电离辐射可以促进HA纳米载体介导的基因在HepG2细胞中的转移和表达,在辐射剂量为6,4Gy时, hGM-CSF基因mRNA相对表达量可达0.9941±0.0703,0.9501±0.5619,与剂量为0Gy的表达量差异有统计学意义(P﹤0.05),但与Lipofectamin2000组比较差异无统计学意义(P﹥0.05),辐射剂量为6,4,2,0Gy时,培养基中hGM-CSF的分泌量分别为499.20±5.76、497.06±4.54、472.53±3.91,428.65±7.16ng/106cell。故当辐射剂量为6,4Gy时,HA纳米载体的转染效率可接近Lipofectamin2000的转染效率。
　　结论:电离辐射可以提高HA纳米载体的转染效率,并且HA纳米载体转hGM-CSF基因的自体肿瘤疫苗联合放疗治疗人类肝细胞癌有望成为可能。

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前言

材料和方法

1、材料

2、方法

结果

3.1质粒转化及鉴定

3.2 pORF-hGM-CSF质粒DNA酶切、电泳分析

3.3质粒DNA的序列测定

3.4质粒DNA的浓度及纯度的测定

3.5 多靶单击模型拟合HepG2剂量-存活曲线结果

3.6 电离辐射对HA纳米颗粒介导的hGM-CSF基因转染效率的影响

3.7 培养基中hGM-CSF的定量测定及分析

讨论

一．pORF-hGM-CSF质粒的转化、抽提及鉴定

二．电离辐射对HepG2细胞增殖生长活性的影响

三．电离辐射对转染后HepG2细胞中hGM-CSF基因的表达及转移的影响

结论

参考文献

羟基磷灰石研究进展

成果目录

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