电离辐射促羟基磷灰石纳米载体介导的hGM-CSF基因在人肝癌HepG2细胞中的转移及表达

摘要

目的 观察电离辐射对羟基磷灰石(HA)纳米载体介导的质粒pORF-hGM-CSF基因转染的影响,并探索能提高HA转染效率的方法.方法 转染细胞前,依据不同辐射剂量下的HepG2细胞剂量—存活曲线选出2、4和6 Gy3种不同剂量进行分组照射.48 h后RT-PCR检测HepG2细胞内hGM-CSF的mRNA表达水平以比较转染效率.结果 电离辐射可以促进HA纳米载体介导的基因在HepG2细胞中的转移和表达,在辐射剂量为6和4 Gy时,hGM-CSF基因mRNA相对表达量可达(0.9941±0.0703)和(0.9501±0.5619),与剂量为0 Gy的表达量差异有显著性(P＜0.05),但与Lipofectamin 2000组比较差异无显著性(P＞0.05),故当辐射剂量为6和4 Gy时,HA纳米载体的转染效率可接近Lipofectamin 2000的转染效率.辐射剂量为6、4、2和0 Gy时,培养基中hGM-CSF的分泌量分别为(499.20±5.76)、(497.06±4.54)、(472.53±3.91)和(428.65±7.16 )ng/106 cell.结论 电离辐射可以提高HA纳米载体的转染效率,并且HA纳米载体转hGM-CSF基因的自体肿瘤疫苗联合放疗治疗人类肝细胞癌有望成为可能.