基于鼻咽癌潜在靶标的活体光学成像与靶向治疗研究

摘要

鼻咽癌是具有地域特性的恶性肿瘤疾病，高发于我国广东，因此又称“广东瘤”。由于其发生部位较小且隐蔽，又与重要器官相邻，所以症状多变或不明显，导致漏诊误诊，常拖至晚期才被诊断出，而晚期的治疗效果差，5年存活率极低，严重的影响到人类健康。因此迫切需要寻找新的鼻咽癌生物标志物，进而针对该生物标志物进行相应的靶向诊疗研究。生物相容性好及靶向性高的仿生纳米载体是实现特异性地杀伤肿瘤而避免其它正常组织不受药物毒害的有效手段之一。为了更好地对鼻咽癌进行研究，需要迫切地建立起可视化鼻咽癌动物模型，能实时动态地监测鼻咽癌的发生发展和转移，进而有效地评估鼻咽癌的诊疗效果。
　　本文旨在寻找出鼻咽癌潜在的生物标志物，建立高信噪比的可视化鼻咽癌动物模型，进而借由高密度脂蛋白仿生纳米载体对鼻咽癌进行有效的靶向诊疗。得出以下结果：
　　（1）发现在鼻咽癌细胞和鼻咽癌患者病理组织中均高表达跨膜蛋白B类1型清道夫受体（SR-B1），故将SR-B1定义为鼻咽癌潜在的生物标志物。研究发现高表达SR-B1的鼻咽癌细胞，侧向迁移能力增强，而纵向侵袭能力受抑制。SR-B1的表达量与癌细胞的生长速度和成瘤性无关。
　　（2）发现仿高密度脂蛋白纳米颗粒（HPPS）能够特异性地识别SR-B1高表达的鼻咽肿瘤，通过抑制肿瘤细胞的侧向迁移能力和克隆形成率，进而显著性地延缓鼻咽癌在活动物体内的生长速度。
　　（3）尝试将携带chol-si-bmi1的HPPS用于鼻咽癌的靶向基因治疗，细胞水平实验结果表明，可以有效地抑制鼻咽癌的侧向迁移能力和克隆形成率，然而动物水平的实验未获得明显的肿瘤生长抑制效果。
　　（4）建立了一系列荧光蛋白标记的可视化鼻咽癌实验动物模型，为鼻咽癌的活体光学成像和靶向治疗提供了良好的动物模型。其中获得了超亮远红荧光蛋白mLumin标记的鼻咽癌5-8F细胞，具有良好的皮下成瘤性和转移性。同时，还获得了一株不成瘤的远红荧光蛋白 Katushka S158A标记鼻咽癌细胞株5-8F-Kattushka S158A。研究证实，这些细胞株的成瘤性与其侧群细胞比率密切相关。
　　（5）建立了基于疱疹病毒1胸苷激酶(TK)、远红荧光蛋白（mLumin）和萤火虫荧光素酶（Fluc）的三融合报告基因的可视化鼻咽癌实验动物模型，可同时用于荧光成像、生物发光成像和microPET成像。由于将远红荧光蛋白引入到三融合报告基因中，明显提升了活体荧光成像的检测能力，从而为肿瘤的多模式成像研究提供了良好的多标记动物模型。
　　本文发现了SR-B1为鼻咽癌的新型潜在生物标志物，为鼻咽癌的靶向诊疗提供了有效的新型膜蛋白运输靶点。证明仿高密度脂蛋白纳米颗粒HPPS能有效的延缓鼻咽癌生长，且能有效的携带siRNA对鼻咽癌细胞进行胞浆释放进而达到基因治疗的效果。该研究建立的一系列可视化鼻咽癌动物模型，为动态监测鼻咽癌的发生发展和转移，有效的药效评估和直观的评判诊疗手段提供了便利。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

1 绪论

1.1 鼻咽癌简介

1.2 鼻咽癌生物标志物的研究进展

1.3 仿HDL纳米颗粒的研究进展

1.4 可视化肿瘤动物模型的建立

1.5 选题背景及本文的主要研究内容

2 SR-B1为潜在的鼻咽癌生物标志物的确立

2.1 引言

2.2 实验材料和方法

2.3 实验结果

2.4 讨论

2.5 本章小结

3 HPPS抑制鼻咽癌生长的作用效应评价

3.1 引言

3.2 实验材料和方法

3.3 实验结果

3.4 讨论

3.5 本章小结

4 HPPS装载chol-si-Bmi1的效率及其生物学效应评价

4.1 引言

4.2 实验材料和方法

4.3 实验结果

4.4 讨论

4.5 本章小结

5 光学成像可视化鼻咽癌实验动物模型的建立

5.1 引言

5.2 实验材料和方法

5.3 实验结果

5.4 讨论

5.5 本章小结

6 结论与展望

6.1 本文的研究内容和结论

6.2 本文的创新点和展望

致谢

参考文献

附录 攻读学位期间发表论文目录