发酵DHA油脂对2型糖尿病作用效果的动物实验研究

摘要

2型糖尿病是一种对人类健康有严重危害的内分泌代谢疾病，而且随着人们生活水平的不断提高，其发病率日益增长。目前治疗2型糖尿病的药物在耐受性、顺应性和不良反应等方面存在许多问题，迫切需要研发一种安全有效的防治方法。
　　DHA（Docosahexaenoic acid,二十二碳六烯酸）是一种n-3系列的多不饱和脂肪酸，目前的研究已表明，DHA具有明显的降血糖和抗炎效果。目前，市场上生产和流通的油脂中DHA含量较低，多分布于30％-40%，严重影响了其在2型糖尿病防治中的应用。基于本实验室前期对裂殖壶菌发酵条件的优化，我们获得了一种高DHA含量的油脂。本文通过构建2型糖尿病大鼠模型，设计了空白组、模型组、阳性对照组、高DHA含量油脂组、低DHA含量油脂组、两种DHA油脂分别与西他列汀联合使用的对照组等实验组，评价该高DHA含量的油脂对2型糖尿病的作用效果，并对其作用机制进行了初步探究。取得以下结果：
　　（1）通过裂殖壶菌发酵获得了一种高DHA含量的油脂。基于碳源种类和温度对裂殖壶菌糖代谢途径和脂肪合成途径的影响，本实验室通过发酵条件优化改进了发酵条件。以优化后的条件：甘油作为碳源，发酵温度为25℃。获得了一种高DHA含量的油脂，其DHA含量为48.1%。
　　（2）采用高糖高脂膳食配合注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）的方式构建2型糖尿病的动物模型。造模的前期，通过高糖高脂膳食诱导使SD雄性大鼠肌肉和其他组织的糖耐量发生异常，引起β细胞分泌障碍，导致胰岛功能下降，形成胰岛素抵抗。再配合注射一定剂量的STZ，加速破坏胰腺细胞，使大鼠发展形成2型糖尿病。造模结束后，大鼠出现明显的2型糖尿病症状，且造模成功率达到了85.88%。
　　（3）通过动物模型评价，证实了高DHA含量油脂对2型糖尿病的作用效果。经过4周的灌胃后，与模型组相比，高DHA含量油脂组中大鼠的HbAc1水平显著下降了16.11%（p<0.01），与二甲双胍达到了一样的良好防治效果。而低含量的DHA油脂组大鼠血清中的HbAc1水平与模型组无明显差异，说明DHA油脂对2型糖尿病的作用效果与DHA含量相关。同时，DHA油脂与西他列汀联合使用可以消除西他列汀单独使用时引起体重增加的不良反应。
　　（4）通过检测2型糖尿病大鼠血清中GLP-1水平、INS水平和计算大鼠ISI指数、IR指数以及采用TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL技术）和抗大鼠Ki-67单的克隆M7249检测了胰岛的细胞凋亡和有丝分裂，初步探究了高DHA含量的油脂对2型糖尿病作用机制。研究结果显示，高DHA含量油脂能通过抑制胰岛细胞凋亡、促进胰岛细胞增殖和刺激胰岛素分泌来降低2型糖尿病大鼠的HbA1c水平和改善胰岛素抵抗，提高胰岛细胞的敏感性。
　　综上所述，本文评价了一种由发酵所得的高DHA含量油脂对2型糖尿病的作用效果，并对其作用机制进行了初步探究，结果显示，该油脂能通过促进胰岛细胞的增殖、抑制胰岛细胞的凋亡和促进胰岛素分泌，降低2型糖尿病大鼠的HbA1c水平，改善胰岛素抵抗和提高胰岛素敏感性。

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1. 绪论

1.1 2型糖尿病的研究进展

1.2 DHA在2型糖尿病防治中的现状

1.3本文研究目的和内容

2. DHA油脂的制备及检测

2.1材料和方法

2.2实验方法

2.3结果与讨论

2.4本章小结

3. 高糖高脂膳食联合STZ诱导建立2型糖尿病的动物模型

3.1材料和方法

3.2结果与讨论

3.3本章小结

4. DHA油脂对2型糖尿病大鼠的影响

4.1材料和方法

4.2结果与讨论

4.3 本章小结

5. DHA油脂对2型糖尿病作用机制的初步探究

5.1 材料和方法

5.2 结果与讨论

5.3 本章小结

6. 总结与展望

6.1总结

6.2展望

致谢

参考文献