玉米花粉中抗辐射活性多糖的筛选与结构表征

摘要

玉米花粉是我国新资源药食同源食品，其中多糖是很重要的功能因子。本文以玉米花粉作为研究对象，采用热水浸提法提取多糖、不同浓度乙醇分级多糖，进行体外抗氧化实验和辐射防护小鼠实验，从而筛选出抗辐射功能较强的活性多糖，并研究活性多糖理化性质及结构。该研究将填补玉米花粉多糖抗辐射作用研究方面的空白，主要研究结果如下：
　　（1）采用热水浸提法提取多糖，60％、80%、95%浓度的乙醇分级多糖，从4500g的预处理花粉里，获得 PPM-A、PPM-B、PPM-C三种多糖的质量分别为49.4g、48.0g、168.5g，采用硫酸-苯酚法测得的多糖含量分别为62.2%、49.15%、36.43%。
　　（2）采用还原力、羟基自由基和超氧自由基自由基反应体系，测定不同浓度 PPM-A、PPM-B、PPM-C的体外抗氧化活性。发现提取物均具有一定的还原力、清除羟基自由基和超氧自由基的能力。综合比较和分析，体外抗氧化能力较强的是多糖 PPM-B。
　　（3）体内小鼠辐射防护作用实验证明，玉米花粉多糖提取物对γ射线引发的氧化损伤、造血系统损伤和免疫系统损伤具有一定的抑制及修复作用。PPM-A、PPM-B、PPM-C能够提高小鼠的肝脾指数、外周血白细胞数，能够提高机体的 SOD酶活力和 GSH-PX酶活力，减少机体 MDA的积累。综合比较和分析，辐射防护作用较强的是 PPM-A。
　　（4）活性多糖 PPM-A是水溶性物质，粘均相对分子量为3.17×105。化学实验证明 PPM-A含有蛋白质、还原性糖、糖醛酸等成分。红外光谱分析，判断 PPM-A是多糖类化合物，含有蛋白质、糖醛酸，同时具有α型糖单元和β型糖单元，含有β-D-吡喃葡萄糖。X射线衍射分析，证实 PPM-A在实验条件下不能结晶。热力学分析，说明 PPM-A在低于110℃时具有良好的热稳定性。

目录

玉米花粉中抗辐射活性多糖的筛选与 结构表征

摘 要

Abstract

第1章 绪 论

1.1 立题背景

1.2 辐射防护作用研究概述

1.2.1 辐射损伤机制

1.2.2 抗辐射作用的研究方法

1.2.3 辐射防护剂的研究现状

1.3 花粉的研究及应用现状

1.4 多糖研究概述

1.4.1 多糖的提取、纯化

1.4.2 多糖的结构解析

1.4.3 多糖的生物活性

1.4.4 多糖的结构修饰

1.4.5 多糖的产品开发、应用

1.5 玉米花粉多糖的研究现状

1.6 本课题研究目的及意义

1.7 本课题主要研究内容

第2章 材料与方法

2.1 实验材料与试剂

2.1.1 实验原料

2.1.2 实验中所用试剂

2.2 实验仪器及设备

2.3 多糖、蛋白质含量测定方法

2.3.1 测定多糖含量

2.3.2 测定蛋白质含量

2.4 玉米花粉多糖的提取

2.4.1 原料预处理

2.4.2 粗多糖的提取

2.4.3 蛋白质的去除

2.4.4 多糖的分级

2.5 体外抗氧化玉米花粉活性多糖的筛选

2.5.1 总还原力的测定

2.5.2 羟基自由基清除率的测定

2.5.3 超氧阴离子自由基清除率的测定

2.6抗辐射玉米花粉活性多糖的筛选

2.6.1 多糖溶液的配制

2.6.2 辐射防护小鼠模型的建立

2.6.3 样品采集与处理

2.6.3 实验指标与方法

2.7 活性多糖的理化性质及结构分析

2.7.1 物理性质分析

2.7.2 化学性质分析

2.7.3 活性多糖粘均相对分子量的测定

2.7.4 活性多糖的紫外光谱扫描

2.7.5 活性多糖的红外光谱分析

2.7.6 活性多糖的热力学特性分析

2.7.7 活性多糖的结晶性能测定

第3章 玉米花粉多糖的提取、分级

3.1 葡萄糖标准曲线

3.2 玉米花粉多糖的提取、分级结果

3.3 含量测定结果

3.4 本章小结

第4章 体外抗氧化玉米花粉活性多糖的筛选

4.1 总还原力的测定

4.2 羟基自由基清除率的测定

4.3 超氧阴离子自由基清除率的测定

4.4 本章小结

第5章 抗辐射玉米花粉活性多糖的筛选

5.1玉米花粉多糖对辐射小鼠肝脾指数的影响

5.2 玉米花粉多糖对辐射小鼠外周血白细胞数的影响

5.3 玉米花粉多糖对辐射小鼠组织SOD活力的影响

5.4 玉米花粉多糖对辐射小鼠组织GSH-PX活力的影响

5.5 玉米花粉多糖对辐射小鼠组织MDA含量的影响

5.6 本章小结

第6章 PPM-A活性多糖的理化分析及结构表征

6.1 PPM-A多糖基本理化性质分析

6.1.1 溶解性分析

6.1.2 化学性质分析

6.2 PPM-A多糖粘均分子量测定

6.3 PPM-A多糖紫外光谱分析

6.4 PPM-A多糖红外光谱分析

6.5 PPM-A多糖结晶性能测定

6.6 PPM-A多糖热力学特性分析

6.7 本章小结

结 论

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果

哈尔滨工业大学学位论文原创性声明及使用授权说明

学位论文出版授权书

致 谢