胆碱和裂殖壶菌油对鸡蛋中二十二碳六烯酸富集的影响

摘要

本试验系统研究了饲粮添加胆碱和裂殖壶菌油（Schizochytrium Oil，SO）对高峰期产蛋鸡卵黄二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid，DHA)富集的影响，旨在提高饲粮DHA向卵黄富集的效率，包括五部分。
　　试验一饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋中DHA富集的影响。选用28周龄海兰褐蛋鸡450只，按产蛋率相近原则分5组（SO0、SO0.25、SO0.50、SO1.00和SO1.50），每组6重复，每重复15只鸡，饲粮分别添加0、0.25％、0.50％、1.00％和1.50％SO，预饲7天，正试期56天。研究表明:随饲粮SO剂量升高，卵黄颜色呈线性增加(P＜0.05)，卵黄n-3多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid，PUFA)和DHA含量二次曲线提高(P＜0.05)，n-6PUFA含量呈线性极显著降低（P＜0.01）;与对照组相比，SO1.50组的n-3PUFA含量提高了173.98mg/egg，DHA提高了163.24mg/egg(P＜0.05)。随饲粮DHA增加，鸡蛋DHA富集率线性极显著降低（P＜0.01），SO0.25、SO0.50、SO1.00和SO1.50组鸡蛋DHA富集率依次为25.08％、20.21％、13.68％、11.97％。以鸡蛋DHA含量和富集率为判据，推荐饲粮中SO的添加量为0.795％。
　　试验二饲粮中添加胆碱、乙醇胺(MEA)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)对鸡蛋中DHA富集的影响。选用28周龄海兰褐产蛋鸡432只，按产蛋率相近原则分6组(对照、胆碱、MEA、LPC、LPC+MEA和胆碱+MEA)，每组6重复，每重复12只鸡，基础饲粮含等量DHA（对照组），在基础饲粮中分别添加胆碱(0.05％);MEA(0.022％);LPC(0.177％);LPC(0.0887％)+MEA(0.011％);胆碱(0.025％)+MEA(0.011％)，提供等摩尔量胆碱、LPC或MEA，正试期28天。研究表明:胆碱组和LPC组卵黄中n-3PUFA和DHA含量（DHA:对照组144.70mg/egg，胆碱组161.02mg/egg，LPC组166.20mg/egg）极显著提高(P＜0.01)。试验初各组卵黄DHA含量无显著差异;1～14天，卵黄DHA含量随试验时间延长而增加;15～28天，各组鸡蛋卵黄中DHA含量趋于稳定。饲粮添加胆碱可促进鸡蛋卵黄DHA富集。
　　试验三饲粮胆碱和裂殖壶菌油促进卵黄DHA富集的适宜用量及其对储存期蛋品质的影响。选用32周龄海兰褐产蛋鸡630只，按产蛋率相近原则分成7组，每组6重复，每重复15只鸡，饲粮中添加胆碱和SO，具体为胆碱0.05（0.05％胆碱+0％SO，对照组）;胆碱0.1包括（0.1％胆碱+0.5％SO），(0.1％胆碱+1.0％SO)和（0.1％胆碱+1.5％SO）;胆碱0.15包括（0.15％胆碱+0.5％SO），（0.15％胆碱+1.0％SO）和（0.15％胆碱+1.5％SO）。预饲7天，正试期84天。研究表明:卵黄颜色随SO剂量升高而显著升高(P＜0.05)。随饲粮中SO水平的提高(0.5％～1.5％)，鸡蛋n-3PUFA和DHA含量极显著提高（P＜0.01），n-3PUFA和DHA的富集率极显著降低(P＜0.01);与胆碱0.1组相比，胆碱0.15组DHA富集率显著提高（P＜0.05）;饲粮添加0.15％胆碱和0.5％SO可使DHA富集率达34.10％（P＜0.05）。以鸡蛋DHA富集量和富集率为判据，添加0.10％胆碱时，8O最适添加剂量为0.601％，添加0.15％胆碱时，SO最适添加剂量为0.449％;4℃储存条件下，储存0～30天，SO组卵黄颜色均显著高于对照组(P＜0.05);各组卵黄中MDA随储存时间增加而极显著增加，DHA含量随储存时间增加而极显著降低(P＜0.01);储存期内，0～20天MDA增加和DHA含量减少均较缓，20天后两者变化较快，以此为判据。4℃储存的DHA鸡蛋，推荐20天内食用。
　　试验四饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对卵黄DHA富集及相关脂质代谢的影响。选用26周龄产蛋鸡288只，按产蛋率无显著差异的原则分4组，每组6重复，每重复12只鸡，饲粮胆碱和SO为2个主效应，具体为胆碱0.05组（0.05％胆碱+0％SO），胆碱0.1组(0.1％胆碱+0％SO)，胆碱0.05-SO0.5组（0.05％胆碱+0.5％SO），胆碱0.1-SO0.5组（0.1％胆碱+0.5％SO）。预饲7天，正试期56天。研究表明:胆碱0.1组卵黄总磷脂和磷脂酰胆碱(PC)含量极显著提高(P＜0.01)。与未添加SO组相比，SO0.5组显著提高了卵黄n-3PUFA和DHA含量(P＜0.05);胆碱与SO对卵黄中DHA含量具及显著交互影响（P＜0.01），胆碱0.1-SO0.5组的鸡蛋卵黄DHA含量最高(P＜0.01)。SO0.5组血清中甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇含量显著降低(P＜0.05);极低密度脂蛋白胆固醇和氧化型低密度脂蛋白胆固醇显著升高（P＜0.05）。脂蛋白酯酶和肝酯酶活性显著提高(P＜0.05);胆碱0.10组肝脏磷酸胆碱胞苷转移酶活性显著高于胆碱0.05组（P＜0.05）。表明胆碱与SO对卵黄DHA富集有交互作用，胆碱可能通过增加卵黄中PC含量来促进卵黄DHA富集。
　　试验五饲粮胆碱添加水平对肝脏DHA-磷脂酰胆碱合成关键酶和卵黄脂质组学的影响。选用28周龄产蛋鸡270只，按产蛋率无显著差异的原则分3组，每组6重复，每重复15只鸡，基础饲粮提供等量SO，胆碱0组不添加胆碱，胆碱0.05组添加0.05％胆碱，胆碱0.15组添加0.15％胆碱。预饲14天，正试期28天。研究表明:饲粮等DHA时，卵黄DHA含量随饲粮胆碱增加极显著提高（P＜0.01）。与胆碱0组相比，胆碱0.15组的合成DHA-PC关键酶中甘油三酯脂酶和溶血卵磷脂酰基转移酶含量显著提高(P＜0.05)。脂质组分析到卵黄含有23种脂质亚类，829种脂质种类，1240种脂质离子。通过脂质亚类定量分析得出胆碱0.15组DHA-PC、DHA-LPC(D HA-溶血磷脂酰胆碱)和DHA-DG（DHA-甘油二酯）显著高于胆碱0组（P＜0.05）。DHA只存在于PC或PE的Sn-2位。DHA-PC的13种脂质离子中PC(18∶0/22∶6)+HCOO变量权重比约84％;DHA-PE的23种脂质离子中PE(16∶0/22∶6)类约占50％，PE(18∶0/22∶6)类约占34％。胆碱0与胆碱0.15的组间差异脂质为PE(18∶0/22∶6)+H和PE(18∶0/22∶6)-H(P＜0.05)，胆碱促进DHA富集时，只提高了DHA在亚类脂质中的绝对含量，未改变含DHA亚类脂质间的比例。
　　综上，本试验条件下，可得出以下结论:本试验中，饲粮添加SO和胆碱对生产性能和蛋品质无不良影响。随饲粮DHA水平增高，卵黄中DHA的富集率降低;添加胆碱可促进DHA富集;以DHA富集量和富集率为判据，添加0.15％胆碱时，推荐SO添加量为0.449％;蛋鸡体内DHA-TG可通过酰基交换和酯交换两种途径转化为DHA-PC，增加饲粮胆碱可为两种途径提供更多的磷脂底物，合成更多DHA-PC和DHA-LPC富集于卵黄中，进而达到促进鸡蛋DHA富集的效果。DHA鸡蛋4℃条件储存20天内，可保持鸡蛋品质、卵黄MDA和DHA含量的相对稳定。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 DHA的生理功能、存在形式及其生物学效价

1．1．1 DHA对神经系统及视网膜的影响

1．1．2 DHA对心脑血管疾病的影响

1．1．3 DHA对机体免疫功能和炎症反应的影响

1．1．4 DHA的抗癌功能

1．1．5 DHA在自然界的分布及存在形式

1．1．6 不同形式DHA的生物学效价

1．2 鸡蛋富集DHA的相关研究

1．2．1 亚麻籽(亚麻油)对鸡蛋卵黄DHA富集的影响

1．2．2 鱼油对鸡蛋卵黄DHA富集的影响

1．2．3 微藻对鸡蛋卵黄DHA富集的影响

1．3 DHA在蛋鸡体内的转化、转运及其在卵黄脂质中的分布

1．3．1 甘油三酯型DHA向卵磷脂型DHA的转化

1．3．2 DHA对产蛋鸡脂质转运的影响

1．3．3 DHA在卵黄脂质中的分布

1．4 胆碱合成甘油磷脂的途径和合成甘油磷脂的其他底物

1．4．1 胆碱生物合成磷脂酰胆碱的途径

1．4．2 合成甘油磷脂的其他底物

1．5 脂质组分析技术在脂类研究中的应用

1．6 本课题研究目的意义及主要研究内容

1．6．1 本课题研究目的意义

1．6．2 本课题的主要研究内容

2 材料与方法

2．1 饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋中DHA富集的影响

2．1．1 试验动物及试验设计

2．1．2 试验原料及饲粮

2．1．3 饲养管理

2．1．4 样品采集

2．1．5 指标测定

2．1．6 统计分析

2．2．1 试验动物及试验设计

2．2．2 试验原料及饲粮

2．2．3 饲养管理

2．2．4 样品采集

2．2．5 指标测定

2．2．6 统计分析

2．3．2 试验原料及饲粮

2．3．3 饲养管理

2．3．4 样品采集

2．3．5 指标测定

2．3．6 统计分析

2．4．2 试验原料及饲粮

2．4．3 饲养管理

2．4．4 样品采集

2．4．5 指标测定

2．4．6 统计分析

2．5．2 试验原料及饲粮

2．5．3 饲养管理

2．5．4 样品采集

2．5．5 指标测定

2．5．6 统计分析

3 结果与分析

3．1 饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋中DHA富集的影响

3．1．1 饲粮裂殖壶菌油水平对生产性能的影响

3．1．2 饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋品质的影响

3．1．3 饲粮裂殖壶菌油水平对卵黄脂肪酸组成的影响

3．1．4 饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋DHA富集的影响

3．2 饲粮中添加胆碱、乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱对鸡蛋中DHA富集的影响

3．2．1 饲粮中添加胆碱、乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱对生产性能的影响

3．2．2 饲粮中添加胆碱、乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱对鸡蛋品质的影响

3．2．3 饲粮中添加胆碱、乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱对多丹黄脂肪酸组成的影响

3．2．4 饲粮中添加胆碱、乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱对鸡蛋DHA富集规律的研究

3．3 饲粮胆碱和裂殖壶菌油促进卵黄DHA富集的适宜用量及其对储存期蛋品质的影响

3．3．1 饲粮中胆碱和裂殖壶菌油联合添加对生产性能的影响

3．3．2 饲粮中胆碱和裂殖壶菌油联合添加对鸡蛋品质的影响

3．3．3 饲粮中胆碱和裂殖壶菌油联合添加对鸡蛋DHA富集的影响

3．3．4 饲粮中胆碱和裂殖壶菌油联合添加对储存期鸡蛋品质的影响

3．3．5 饲粮中胆碱和裂殖壶菌油联合添加对储存期鸡蛋卵黄MDA和DHA含量的影响

3．4 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对卵黄DHA富集及相关脂质代谢的影响

3．4．1 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对蛋鸡生产性能的影响

3．4．2 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对鸡蛋品质的影响

3．4．3 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对鸡蛋卵黄脂质的影响

3．4．4 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对卵黄脂肪酸组成的影响

3．4．5 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对产蛋鸡机体脂质转运的影响

3．4．6 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对产蛋鸡脂代谢关键酶的影响

3．5 饲粮胆碱添加水平对肝脏DHA-磷脂酰胆碱合成关键酶和卵黄脂质组学的影响

3．5．1 饲粮胆碱添加水平对卵黄脂肪酸组成的影响

3．5．2 饲粮胆碱添加水平对产蛋鸡肝脏中DHA-PC合成关键酶的影响

3．5．3 饲粮胆碱添加水平对鸡蛋卵黄脂质组成的影响

4 讨论

4．1 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对产蛋鸡生产性能的影响

4．2 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对鸡蛋品质的影响

4．3 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对储存期DHA蛋品质的影响

4．4 饲粮中添加胆碱和裂殖壶菌油对卵黄脂质、DHA富集的影响

4．5 饲粮中添加胆碱与裂殖壶菌油对产蛋鸡脂质代谢的影响

4．6 基于脂质组学分析胆碱促进鸡蛋卵黄DHA富集的途径

5 结论

致谢

参考文献

附录

攻读博士学位期间发表的学术论文