自噬在机械通气所致大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用及意义

摘要

本文主要从以下几方面展开论述：
　　第一部分:大鼠机械通气所致呼吸机相关性肺损伤模型的建立。
　　目的：
　　建立大鼠机械通气所致相关性肺损伤的动物模型，研究不同潮气量机械通气对大鼠肺组织的影响情况。
　　方法：
　　健康雄性SPF级SD大鼠30只，周龄7周，体重(220±20g)，实施麻醉和气管切开术后分别接受不同潮气量(VT)的通气(通气时间均为4h)。随机分为以下3组:对照组（A组，仅行气管插管并保留自主呼吸）;常规通气组（B组，VT=10ml/kg）;损伤通气组(C组，VT=40ml/kg)。A组在气管插管后即刻，其他组在机械通气结束后放血处死动物，计算肺湿/干比重比值（W/D比值），HE染色观察肺组织病理学变化。
　　结果：
　　在大潮气量机械通气4h后，光镜下病理学检查结果显示A、B组病理形态大致正常，C组肺组织中可见肺泡间隔增宽，肺泡腔渗液明显增加，其内可见炎性细胞浸润并有大量散在出血点;与A、B相比，C组肺组织W/D比值明显增加(P＜0.05)。
　　结论：
　　大潮气量机械通气能够诱导大鼠呼吸机相关性肺损伤的发生，通过肺组织湿干比重和肺组织病理学检查提示复制大鼠呼吸机相关性肺损伤动物模型成功。
　　第二部分:自噬在机械通气所致大鼠呼吸机相关性肺损伤过程中的作用及意义。
　　目的：
　　评价机械通气相关性所致肺损伤(VILI)过程中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和炎症相关因子NF-κB表达的意义。
　　方法：
　　健康雄性SPF级SD大鼠30只，周龄7周，体重（200-250g），实施麻醉和气管插管术后分别接受不同潮气量(VT)的通气（通气时间均为4h）。随机分为以下3组:对照组（A组，仅行气管插管并保留自主呼吸）;常规通气组(B组，VT=10ml/Kg);损伤通气组(C组，VT=40ml/Kg)。A组在气管插管并自主呼吸4h后，其他组在机械通气结束后放血处死动物，计算BALF中白细胞计数(WBC)和总蛋白含量，ELISA试剂盒检测BALF中炎症因子TNF-α和IL-1β的含量，使用MPO、SOD及MDA试剂盒检测肺组织匀浆中相应指标的表达水平，Western Blot法检测肺组织中自噬相关基因Beclin1、LC3及NF-κB的表达水平。
　　结果：
　　在大潮气量机械通气4h后，肺组织中总蛋白含量、白细胞计数和MPO、MDA等指标均显著增加(P＜0.05)，SOD含量明显降低(P＜0.05);肺组织中Beclin1、LC3、NF-κB表达水平均显著增加(P＜0.05);而这一作用能够被自噬特异性抑制剂3-MA所抑制。
　　结论：
　　在大潮气量通气所致的大鼠呼吸机相关性肺损伤过程中，自噬对于VILI过程中的炎症反应起着十分重要的作用，其机制可能与NF-κB信号通路有关，这一作用可以被自噬特异性抑制剂3-MA所抑制，说明在VILI导致炎症形成的过程中自噬可能是一种保护机制。

目录

声明

摘要

第一部分 大鼠机械通气所致呼吸机相关性肺损伤模型的建立

材料和方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

第二部分 自噬在机械通气所致大鼠呼吸机相关性肺损伤过程中的作用及机制

材料和方法

结果

讨论

附图表

参考文献

个人简历、攻读学位期间发表论文

致谢