纳他霉素高产菌株的诱变选育及发酵工艺的优化

摘要

纳他霉素(Natamycin)是一种含有二十六环的多烯大环内脂类抗生素，是一种广谱、高效的抗真菌抗生素。现已被广泛应用于食品和医疗等领域，但由于纳他霉素发酵水平较低，导致成本高、应用受到限制，因此选育纳他霉素高产菌株的筛选具有重要意义。本文通过诱变筛选出一株高产菌株，并在发酵工艺优化等方面对纳塔尔链霉菌进行了系统的研究。
　　本研究主要内容包括：⑴以纳塔尔链霉菌N8为出发菌株，首先对其发酵特性进行了研究。结果显示在温度为28℃，种子培养时间为38h，接种量为9％，发酵培养基配方(%)：葡萄糖2，可溶性淀粉4，黄豆饼粉4，酵母浸膏0.7，培养基初始 pH7.2，发酵时间5天时，出发菌株产量最大达到1300mg/L。⑵对试验菌株分别用紫外和低能离子注入复合诱变。通过研究发现，最佳紫外诱变参数：紫外灯功率15w，样品距离灯管30cm，处理30s。最佳离子注入诱变参数：能量8kev，剂量2×1014 ions/cm2。在此条件下，硫酸链霉素最小抑制浓度0.6μg/mL时筛选出一株稳定的纳他霉素高产菌株UV-N-8和UV-N23，其纳他霉素产量达到2130mg/L和2000mg/L，比出发菌株产量高71%和65%。⑶以UV-N-8为出发菌株，选择对纳他霉素产量有显著影响的因子进行响应面优化，优化后得到发酵培养基最佳工艺参数为：葡萄糖1.783%，可溶性淀粉4.498%，黄豆饼粉3.618%，酵母浸膏0.694%。在此条件下，纳他霉素产量的理论预测值可达到2212mg/L，实际值平均为2198mg/L，比优化前提高3.2%。⑷研究了乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠等不同前体及真菌诱导子对纳他霉素产量的影响，结果表明当发酵24h时加入终浓度为0.6%的丙酸钠时产量达到最高，为3800mg/L。产黄青霉和刺孢小克银汉霉发酵液均能促进纳他霉素产量提高。

目录

第1章 绪论

1.1引言

1.2纳他霉素概述

1.3纳他霉素育种进展研究

1.4前体和生物诱导子对微生物产次级代谢产物的影响

1.5纳他霉素高产菌株诱变选育的研究

1.6本研究的目的意义

1.7本论文的研究内容及思路

第2章 纳塔尔链霉菌N8的特性研究

2.1前言

2.2材料与方法

2.3结果与分析

2.4本章小结

第3章 纳塔尔链霉菌N8的诱变选育

3.1前言

3.2实验材料与方法

3.3结果与分析

3.4本章小结

第4章 纳塔尔链霉菌高产菌株发酵工艺优化

4.1前言

4.2实验材料与方法

4.3结果与分析

4.4本章小结

第5章 结论与展望

5.1结论

5.2展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果