蛹虫草多糖对H22小鼠瘤组织中Bcl2、Bax及Cleaved-Caspase-3的影响

摘要

目的:
　　探讨蛹虫草多糖对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。
　　方法:
　　本实验分为正常组、构建H22荷瘤小鼠模型后随机分为模型组、蛹虫草多糖低剂量组、蛹虫草多糖中剂量组、蛹虫草多糖高剂量组以及环磷酰胺组，共6组。正常组与模型组每日腹腔注射生理盐水，蛹虫草多糖低剂量组按每日25mg/kg剂量腹腔注射给药，蛹虫草多糖中剂量组按每日50mg/kg剂量腹腔注射给药，蛹虫草多糖高剂量组按每日100mg/kg剂量腹腔注射给药，环磷酰胺组每日30mg/kg剂量腹腔注射给药，连续给药10天，末次给药24小时后处死小鼠，称取体重，分别解剖胸腺以及脾脏并称重;HE染色观察肿瘤细胞状态;通过RT-PCR实验检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中Bcl2、Bax基因mRNA表达水平;通过Western Blot实验检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中Bcl2、Bax以及Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。
　　结果:
　　1.H22荷瘤小鼠腋下全部成瘤，成瘤率为100％。
　　2.与模型组相比，蛹虫草多糖各组能够明显提高H22荷瘤小鼠的胸腺指数。
　　3.HE染色结果显示，与模型组相比，蛹虫草多糖各组肿瘤细胞出现凋亡形态改变。
　　4.RT-PCR结果显示，与模型组相比，蛹虫草多糖各组能够明显下调Bcl2基因mRNA的表达水平，上调Bax基因mRNA的表达水平。
　　5.Western Blot结果显示，与模型组相比，蛹虫草多糖各组能够明显下调Bcl2蛋白表达水平，上调Bax蛋白和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达水平。
　　结论:
　　1.蛹虫草多糖能够提高H22荷瘤小鼠胸腺指数。
　　2.蛹虫草多糖可能通过调控H22荷瘤小鼠肿瘤组织中Bcl2、Bax以及Cleaved-Caspase-3表达水平来发挥促进细胞凋亡的作用。

目录

缩略语表

摘要

前言

文献综述

1．中药多糖抗肿瘤的作用机制研究进展

1．1 增强机体免疫能力

1．2 影响肿瘤细胞膜生长特性

1．3 抑制肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞凋亡

1．4 影响细胞凋亡信号转导

1．5 抑制肿瘤侵袭和转移

1．6 清除自由基

2．细胞凋亡与调控基因

2．1 细胞凋亡

2．2 Bcl-2研究进展

2．3 Caspase家族研究进展

3．蛹虫草多糖的研究进展

3．1 蛹虫草多糖简介

3．2 蛹虫草多糖提取方法

3．3 蛹虫草多糖生物活-I生

实验研究

1．实验材料

1．1 实验细胞及动物

1．2 主要实验仪器

1．3 实验药物

1．4 主要实验试剂

1．5 主要试剂配制

2．试验方法

2．1 小鼠肝癌H22细胞培养

2．2 H22肝癌细胞皮下移植瘤模型的建立

2．3 实验动物分组

2．4 动物处死及取材

2．5 胸腺指数、脾脏指数的测定

2．6 HE染色

2．7 半定量RT-PCR检测mRNA表达水平

2．8 Western Blot检测蛋白表达水平

2．9 统计学方法

结果

1．蛹虫草多糖对H22荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响

2．HE染色

3．RT-PCR检测蛹虫草多糖对H22荷瘤小鼠Bcl2、BaxmRNA表达水平的影响

4．Western Blot检测蛹虫草多糖对H22荷瘤小鼠Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

5．Western Blot检测蛹虫草多糖对H22荷瘤小鼠活化的Cleaved-Caspase-3蛋白表达的影响

讨论

结论

参考文献

致谢

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