OPN、IIAsPLA2、ZO-1及Occludin在胃黏膜上皮内瘤变和胃癌内镜活检组织中的表达及意义

摘要

胃癌演变过程是一个连续的组织学事件，即幽门螺杆菌(H.pylori)感染→慢性弥漫性炎症→黏膜萎缩→肠化生→异型增生（上皮内瘤变）→胃癌韵模式[1]，多种癌基因的启动、抑癌基因的失活、细胞因子、多种蛋白的表达及下调等参与了这一过程[2]，在这一过程中对于早期胃癌的发现、确诊和治疗是改善胃癌患者预后和提高生活质量的关键。胃黏膜上皮内瘤变是胃癌发生过程中一个特殊阶段，完全具备肿瘤性病变的特点，但因病变尚局限于上皮内，未侵犯相邻的组织而被视为一种癌前病变，在早期胃癌的检出率及内镜下治疗中有极高的价值[3]。胃镜活检取材深度不够及传统的HE染色准确度过低，对于诊断早期胃癌浸润状况欠佳[4]，影响早期胃癌诊断和内镜下治疗后胃癌复发的评估。细胞瘤变早期即有相关基因和蛋白表达，所以对胃活检和内镜下切除组织标本中相关基因和蛋白的检测，可协助诊断早期胃癌的发生、浸润和转移，评估早期胃癌行内镜下治疗发生复发的风险。近年来研究发现骨桥蛋白(osteopontin， OPN)、ⅡA组分泌型磷脂酶A2（secretory groupⅡA phospholipase A2，ⅡA sPLA2）、zouna occludens(ZOs)蛋白及闭锁蛋白(occludin)参与肿瘤细胞增殖、抑制凋亡，介导肿瘤细胞与间质细胞的黏附，引起多种溶解酶合成、分泌，从而溶解细胞外基质，还能诱发新生血管形成，或与其它生长因子及癌基因共同促进多种恶性肿瘤的生长浸润及转移，可能参与胃癌的发生和转移。
　　 目的：观察OPN、ⅡA sPLA2、ZO-1及Occludin在胃黏膜上皮内瘤变和胃癌中的表达及意义。
　　 方法：所选20例正常胃黏膜（对照组）、20例胃黏膜上皮内瘤变和20例胃腺癌组织来自2010年3月至2011年1月，在河北医科大学第二医院消化内镜中心行胃镜活检或治疗标本，上皮内瘤变和胃腺癌病例在手术前均未经行放化疗和免疫疗法，所有患者在胃镜窄带成像系统和亚甲蓝或2％靛胭脂染色辅助下应用一次活检钳钳取病变胃黏膜组织4块，将其中两块组织迅速置于4℃DEPC水中洗去血液后，置冻存管中保存于液氮中，Real time Q-PCR测定mRNA表达。另两块组织以4％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm超薄切片，做HE染色在光镜下观察黏膜的形态学改变以确定诊断，并采用免疫组织化学(SP)的方法检测OPN、ⅡA sPLA2、ZO-1及Occludin的表达，应用Spss for windows13.0对所有数据进行统计学处理，观察上述基因表达情况。
　　 结果：光镜下观察，正常胃黏膜胃腺体整齐，高度一致，上皮细胞排列整齐；上皮内瘤变黏膜胃腺体呈异型，腺体排列密集，腺管细胞出现假复层，细胞核染色浓重，出现核分裂相；胃腺癌黏膜排列紊乱，变短或缺失，绒毛间距变宽，并可见上皮细胞及腺体坏死。免疫组化结果显示：OPN阳性表达为肿瘤细胞胞浆呈棕黄色，ⅡA sPLA2、ZO-1及Occludin阳性表达为细胞浆和细胞膜呈棕黄色。胃腺癌组OPN的阳性表达(0.13±0.06)高于正常胃黏膜组（0.03±0.01）和上皮内瘤变组（0.07±0.00）（P＜0.05），各组间有差别(P＜0.05);ⅡA sPLA2胃腺癌组阳性表达(0.17±0.02)高于正常胃黏膜组(0.11±0.00)和上皮内瘤变组(0.14±0.01)(P＜0.05)，各组间有差别(P＜0.05)；ZO-1在正常胃黏膜阳性表达(0.06±0.02)，与上皮内瘤变(0.06±0.01)组无差别（P＞0.05），在胃腺癌组减少(0.04±0.00)，胃腺癌组低于正常组(P＜0.05)。Occludin胃癌组阳性表达（0.11±0.01)较正常黏膜组表达（0.07±0.02）减少(P＜0.05），而与上皮内瘤变组与正常黏膜无差别（P＞0.05）。Real time Q-PCR结果显示：胃癌组OPN mRNA的阳性表达(1.52±0.05)高于正常胃黏膜组（1±0.00）和上皮内瘤变组（1.24±0.08）(P＜0.05)，各组间有差别(P＜0.05);ⅡA sPLA2 mRNA胃腺癌组(1.49±0.04)高于正常胃黏膜组(1±0.00)和上皮内瘤变组(1.22±0.03)(P＜0.05)，各组间有差别(P＜0.05);ZO-1mRNA在正常胃黏膜表达(1±0.00)，与上皮内瘤变组（1.02±0.05）无差别，胃腺癌组减少(0.87±0.05)，胃腺癌低于上皮内瘤变组(P＜0.05);OccludinmRNA胃癌组（0.87±0.02）较正常黏膜组（1±0.00）表达减少（P＜0.05），而与上皮内瘤变组与正常黏膜无差别(P＞0.05)。
　　 结论：OPN、ⅡA PLA2、ZO-1及Occludin在正常胃黏膜、胃黏膜上皮内瘤变及胃腺癌中表达，OPN和ⅡA PLA2表达及mRNA表达在胃黏膜上皮内瘤变及胃腺癌中逐渐增高，在ZO-1及Occludin表达及mRNA在胃黏膜上皮内瘤变及胃腺癌中低表达，胃腺癌中降低更明显。OPN、ⅡA sPLA2、ZO-1及Occludin可能参与胃腺癌的发生、发展、浸润及转移。

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文摘

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OPN、ⅡA sPLA2、ZO-1、及Occludin在胃黏膜上皮内瘤变和胃癌内镜活检组织中的表达及意义

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 骨桥蛋白、ⅡA分泌型磷脂酶A2、ZO-1及Occludin基因与肿瘤关系

参考文献

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