DOK3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响和胃上皮内瘤变内镜活检与切除病理差异分析

摘要

本文主要从几下几方面进行阐述：
　　第一部分 DOK3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响
　　目的：
　　探索DOK3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。
　　方法：
　　通过免疫组织化学方法，检测35例慢性浅表性胃炎、13例LGIN、38例HGIN、24例EGC组织DOK3表达水平。应用real time PCR和Western Blot技术检测3种胃癌细胞系DOK3 mRNA及蛋白水平的表达，之后应用RNA干扰技术以Lipofectamine(@)RNAiMAX介导靶向DOK3的siRNA转染人胃癌细胞，应用CCK-8、细胞划痕实验分析转染前后肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移等细胞表型的变化。
　　结果：
　　(1)DOK3在慢性浅表性胃炎组、LGIN组、HGIN组、EGC组阳性表达率分别为80％、61.5％、52.5％、37.5％。HGIN组和EGC组中DOK3的阳性表达率均明显低于慢性浅表性胃炎组(P＜0.05)，而慢性浅表性胃炎组与LGIN组、LGIN组与HGIN组之间差异均无统计学意义(P＞0.05)
　　(2)DOK3在胃癌细胞中呈低表达，其表达量由高到低分别为:HGC-27、MGC-803、 AGS。
　　(3)应用RNA干扰技术行HGC-27胃癌细胞DOK3基因敲降后，CCK-8实验显示敲降DOK3后可明显促进胃癌细胞增殖(P＜0.05)，细胞划痕实验显示其侵袭迁移能力明显增强(P＜0.05)。
　　结论：
　　(1)DOK3在EGC和HGIN中的阳性表达率明显低于慢性浅表性胃炎、LGIN组织中的表达，提示DOK3可能是胃癌变早期重要生物学事件，其可能参与了癌前病变癌变及胃癌的发生、发展，可能具有一定分子生物学诊断价值。
　　(2)DOK3基因敲降后，其mRNA和蛋白水平显著降低，可促进HGC-27胃癌细胞增殖及侵袭迁移能力，提示DOK3可能为一抑癌基因。
　　第二部分 胃上皮内瘤变内镜活检与切除病理差异分析
　　目的：
　　胃上皮内瘤变是胃癌的癌前病变。随着内镜下切除病变的发展，目前依靠内镜下活检病理诊断胃上皮内瘤变是有争议的。本研究的目的是比较分析胃镜活检(Endoscopic forceps biopsy，EFB)和内镜下切除(Endoscopic resection，ER)病理检查诊断胃上皮内瘤变的价值。
　　方法：
　　选取本院2010年1月-2015年3月内镜下活检病理诊断为胃上皮内瘤变患者98例，包括20例LGIN，65例HGIN，13例EGC。所有患者均行内镜下切除术。分析术前术后病理差异率、临床特征和内镜表现。
　　结果：
　　EFB与ER病理总体差异率为55.1％。20例术前活检病理为LGIN患者，ER后7例诊断为HGIN(35％，7/20)，5例诊断为胃癌(25％，5/20)。65例术前活检病理诊断为HGIN，ER后38例诊断为胃癌38例(差异率:58.5％，38/65)。病变大小＞2cm，表面充血是术前术后病理差异的主要因素(P＜0.001，P＜0.05)。
　　结论：
　　内镜下活检明确诊断胃上皮内瘤可靠性欠佳。内镜下切除不仅是作为治疗胃上皮内瘤变的主要手段，也是明确组织学诊断的一个重要方法。

目录

缩略词表

摘要

第一部分 DOK3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响

前言

材料和方法

结果

1．DOK3在早期胃癌及癌前病变组织中蛋白表达水平

2．DOK3在不同分化胃癌细胞系中的表达水平

3．HGC-27胃癌细胞敲降DOK3表达效率的鉴定

4．DOK3敲降后对HGC-27胃癌细胞系增殖的影响

5．DOK3敲降后对HGC-27胃癌细胞系侵袭迁移的影响

讨论

小结

第二部分 胃上皮内瘤变内镜活检与切除病理差异分析

前言

资料与方法

结果

1．患者临床及内镜特征

2．EFB与ER病理比较

3．EFB和ER病理差异相关因素分析

讨论

小结

论文综述 胃癌及癌前病变的生物学研究进展

参考文献

致谢

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