CYP450基因多态性分析及CYP2C19与消化道溃疡患者奥美拉唑疗效的相关性研究

摘要

目的:研究调查北京郊区汉族人群P450家族代谢酶CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2D6*10、CYP3A4*18、CYP3A5*3的基因多态性，及其突变频率，了解并探讨其基因型，以期为临床药物治疗提供遗传学依据。奥美拉唑等质子泵抑制剂是消化科使用的一线药物，对于消化道溃疡，胃食管反流及幽门螺旋杆菌的治疗，起着关键性作用。临床上发现其药效存在明显的个体差异。CYP2C19在奥美拉唑药物代谢方面发挥了重要作用，研究CYP2C19*2，*3基因型及奥美拉唑用药后的治疗效果，以期明确CYP2C19基因型与奥美拉唑治疗效果之间是否存在明确的相关性，并以此指导临床用药。
　　 方法:收集北京郊区二级医院（长辛店医院、大兴医院）2009年1月-2012年9月消化内科患者300例，从中筛选出胃十二指肠溃疡病史患者200名，年龄、性别不限。采集肘静脉血标本3ml，加入含EDTA抗凝剂的真空抽血管，使用基因组DNA快速提取试剂盒，按说明书提取基因组DNA。采用Realtime-PCR方法，分析CYP450家族代谢酶CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2D6*10、CYP3A4*18、CYP3A5*3的基因多态性，使用ABI7500fas型荧光定量PCR仪，对P450的6种基因型进行分析判读，用直接计数法计算其基因型频率及等位基因突变频率。本研究运用Hardy-Weinberg平衡定律对基因型分布吻合度进行检验。并对基因型间有无性别差异，等位基因突变频率有无差异进行卡方检验。
　　 选取胃溃疡及十二指肠溃疡患者，按检测结果分为快代谢组和慢代谢组，2组均服用奥美拉唑4周，记录治疗前和用药期间的患者胃酸PH值、腹痛、反酸、腹胀和嗳气症状的变化，以奥美拉唑药物使用后PH值及症状缓解情况为指标，评价其治疗效果。运用统计软件SPSS13.0进行统计学分析，最终分析两组间治疗效果与CYP4502C19*2、*3基因型的相关性。
　　 结果:
　　 1、检测300名患者CYP450基因，发现CYP2C9基因野生型纯合子AA型为276例(92％)，杂合子AC型为21例(7％)，突变型纯合子CC型为3例(1％)，A、C等位基因频率分别为99％和1％; CYP2C19*2野生型纯合子GG型为168例(56％)，杂合子GA型为111例(37％)，突变型纯合子AA型为21例(7％)、G、A等位基因频率分别为93％和7％;CYP2C19*3野生型纯合子GG型为264例(88％)，杂合子GA型为33例(11％)，突变型纯合子AA型为3例(1％)、G、A等位基因频率分别为99％和1％; CYP2D6*10野生型纯合子CC型为81例(27％)，杂合子CT型为138例(46％)，突变型纯合子TT型为81例(27％)、C、T等位基因频率分别为73％和27％; CYP3A4*18野生型纯合子TT型为291例(97％)，杂合子TC型为9例(3％)，突变型纯合子CC型为0例(0％)、T、C等位基因频率分别为97％和3％; CYP3A5*3野生型纯合子AA型为27例(9％)，杂合子AG型为81例(27％)，突变型纯合子GG型为192例(64％)。A、G等位基因频率分别为36％和64％。比较6种基因型间性别差异，发现无统计学意义(P＞0.05)。均符合Hardy-Weinberg平衡遗传定律(P＞0.05)。（见Table.1）
　　 2、与欧洲白种人基因型突变频率相比较，x2检验发现北京郊区汉族人群CYP450家族代谢酶CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2D6*10、CYP3A4*18、CYP3A5*3等位基因突变频率与欧洲白种人突变频率有显著差异，基因多态性存在人种间差异。
　　 3、服用奥美拉唑治疗胃十二指肠溃疡患者中，各组间每周的pH值及腹痛消失比率有显著差异，慢代谢（CYP2C19*2/*3、*2/*2、*3/*3）组用药第1周pH值为3.8，腹痛缓解率为48％，;至第4周pH值提高至5.6，腹痛缓解率为98％。在第1周，快代谢组（CYP2C19*1/*1、*1/*2、*1/*3）的pH值为3.5，腹痛缓解率为47％，;第4周pH值在4.9，腹痛缓解率为85％，明显低于慢代谢组(P＜0.05)。慢代谢组的腹胀和嗳气缓解率在用药第4周为95％，快代谢组为81％。用药期间2组患者最终的缓解率有明显差异。服用奥美拉唑治疗胃十二指肠溃疡的效果与其基因型相吻合，慢代谢型患者使用奥美拉唑效果及pH值提高时间明显优于快代谢组。慢代谢组使用奥美拉唑效果更好。
　　 结论:
　　 1、北京郊区汉族人群P450家族代谢酶CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2D6*10、CYP3A4*18、CYP3A5*3的基因存在多态性，各基因型分布规律不同。三种基因类型间无性别差异。样本具有种群代表性，与欧洲白种人基因突变频率存在明显差异。其中CYP3A4*18未检出纯合型突变，3A4*18基因不是造成3A4酶活性改变的主要因素。
　　 2、奥美拉唑治疗效果与其基因型相吻合，CYP4502C19的基因型是影响奥美拉唑效果的重要因素。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

统计学方法

结果

附图

附表

讨论

一 CYP2C9

二 CYP2D6

三 CYP3

四 CYP2C19

结论

参考文献

综述 CYP450基因多态性与药物相关性分析

致谢

个人简历