植物激活蛋白对烟草花叶病毒（TMV）的生物活性及作用机理初探

摘要

本研究分别以烟草花叶病毒的系统寄主(三生烟)和枯斑寄主(珊西烟)为试验材料，运用常规生物测定和间接ELISA、Western Blotting、半定量PCR等分子生物学方法测定植物激活蛋白对烟草花叶病毒病的防治效果。结果表明，植物激活蛋白对烟草花叶病毒有较高的防治效果。植物激活蛋白预防系统寄主抗TMV效果达67.27﹪，治疗效果达66.73﹪；对离体叶片的枯斑抑制率达40.23﹪，并且抑制枯斑的扩展，抑制率达30.39﹪。烟草经植物激活蛋白处理后再接种TMV，枯斑中TMV外壳蛋白含量减少22.75﹪；叶片中外壳蛋白含量减少25﹪，TMV中RNA含量减少28﹪。

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第一章引言

第二章植物激活蛋白对烟草花叶病毒的生物活性

1材料和仪器

1.1材料

1.2试剂

1.3试验器材及仪器

2试验方法

2.1传统方法

2.2分子生物学方法

3试验结果

3.1植物激活蛋白对盆栽三生烟上TMV的作用

3.2植物激活蛋白对离体叶片上TMV的抑制

3.3植物激活蛋白对TMV在叶片上扩展度的影响

3.4植物激活蛋白对盆栽三NN生烟上CMV的作用

3.5 TMV的纯化结果和抗血清的效价分析

3.6用ELISA方法鉴定植物激活蛋白对TMV外壳蛋白含量的影响

3.7 Western blotting方法鉴定植物激活蛋白对TMV外壳蛋白含量的影响

3.8烟草叶片总RNA的提取

3.9用半定量RT-PCR方法鉴定植物激活蛋白对TMV-RNA含量的影响

第三章植物激活蛋白对烟草花叶病毒的作用机理研究

1试验材料与仪器

1.1试验材料

1.2试剂及溶液

1.3主要仪器设备

2试验方法

2.1植物激活蛋白对烟草叶片中防御性物质的诱导作用

2.2植物激活蛋白对烟草叶片中PR-5dB基因转录水平的影响

2.3植物激活蛋白对烟草花叶病毒外壳蛋白体外聚合过程的影响

2.4植物激活蛋白对TMV的体外抑制

3结果与分析

3.1植物激活蛋白对烟草叶片中超氧化特歧化酶（SOD）活性的作用

3.2植物激活蛋白对烟草叶片中PR-5dB基因转录水平的影响

3.3植物激活蛋白对烟草花叶病毒衣壳蛋白体外聚合过程的影响

3.4植物激活蛋白对TMV的体外侵染活性的影响

第四章讨论

1植物激活蛋白对烟草花叶病毒的生物活性

2植物激活蛋白对烟草花叶病毒的作用机理

第五章结论

参考文献

附录A所用试剂与缓冲液配制

附录B缩写词与英汉对照

在读期间已发表论文

作者简历

致谢