植物激活蛋白的纯化及其抗病作用机理初探

摘要

本实验对植物激活蛋白处理的接种番茄灰霉病菌的番茄幼苗中三种主要防御酶POD、PPO、CAT活性、POD同工酶的动态变化及植物激活蛋白对番茄叶片中Npr1抗病性通调基因及参与蜡质合成基因Cer1进行了研究。　　本文结果说明，植物激活蛋白能诱导植物防御酶系中重要成员POD、PPO、CAT的表达，以及Npr1，Cer1基因的相对表达水平差异表达。从分子水平和代谢水平说明了植物激活蛋白具有激活植物防御反应和系统获得抗性抗病性信号传导通路调控基因的一些作用机制，进一步的结果还有待研究。 本研究通过对植物激活蛋白抗病作用机制的阐明为适时、适量的田间应用提供理论指导。

目录

文摘

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第一章绪论

1国内外研究概况

1.1诱导抗病性产生的相关机制

1.2几种相关防御酶与诱导抗性的关系

1.3 Npr1，Cer1基因在植物诱导抗病性中的作用

2研究的目的和意义

3研究内容和方法

附图

第二章植物激活蛋白的纯化

1材料与方法

1.1溶液的配制

1.2粗蛋白的进一步纯化

1.3样品的制备及电泳

1.4植物激活蛋白诱导抗病性测定

2结果与分析

第三章植物激活蛋白对番茄幼苗主要防御酶酶活性的影响

1材料与方法

1.1材料

1.2有关试剂及溶液的配置

1.3方法

2结果与分析

2.1植物激活蛋白诱导番茄抗番茄灰霉病的防治效果

2.2植物激活蛋白对POD活性的影响

2.3植物激活蛋白对PPO活性的影响

2.4植物激活蛋白对CAT活性的影响

2.5植物激活蛋白对POD同工酶的诱导作用

3讨论与结论

3.1植物激活蛋白不同浓度对番茄三种防御酶活性的影响

3.2番茄灰霉病菌对番茄POD和PPO活性的影响

3.3番茄灰霉病菌对番茄POD同工酶的影响

第四章植物激活蛋白对番茄叶片中Npr1、Cer1基因相对转录水平的影响

1材料与方法

1.1实验材料与试剂

1.2番茄DNA提取——十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法

1.3番茄叶片总RNA的提取—Trizol法

1.4 cDNA的合成及PCR扩增

2结果分析

2.1番茄叶片DNA和总RNA的含量测定

2.2用番茄Actin基因对反转录产物(模板)进行均一化

2.3 PCR或RT-PCR可信度的研究

2.4番茄叶片中Npr1,Cer1基因表达的相对水平及PCR反应条件的影响

2.5植物激活蛋白对Npr1,Cer1基因相对表达水平的影响

3讨论

参考文献

致谢

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