红汁乳菇菌丝体深层培养的研究

摘要

红汁乳菇是红菇科乳菇属真菌，主要分布于我国和日本等地。红汁乳菇是一种菌根食用菌，它与马尾松共生，因其生长需要特殊的生态条件、营养方式和子实体分化条件，目前尚不能人工栽培。其市场供应全靠野生采集，由于野生红汁乳菇过度采摘，导致产地自然资源严重破坏，产量逐渐减少。为了保护食用菌资源多样性和满足消费者对食用菌的需求，运用深层培养技术培养红汁乳菇等食用菌根菌成为目前国内外研究的热点。本论文研究、优化了红汁乳菇液体发酵培养基及其发酵条件，并采用恒温振荡培养箱和生物发酵罐对红汁乳菇液体菌种深层培养过程包括主要胞外酶活性、pH值、还原糖等生理指标变化与生物量的关系进行了系统的研究。为红汁乳菇的工业化生产提供了科学依据和技术参数。主要研究结果如下： 1.在单因素实验的基础上，对红汁乳菇摇瓶发酵培养基进行了优化。结果为：果糖30.253g/L，蛋白胨3.576g/L，K2HPO42.5g/L，可获得最大的红汁乳菇菌丝体产量0.763g/100mL，此结果经实验验证可信。 2.在单因素实验的基础上，对红汁乳菇摇瓶深层发酵培养条件进行了优化。结果为：初始pH值为5.0，装液量为60mL，摇床转速为140rpm，以6％的接种量接种3天的种子液，27℃下培养菌丝体能达到最大产量，其理论值为0.813g/100mL，比单纯用优化培养基的理论预测提高了6.5％。 3.在摇瓶实验的基础上，对最佳的发酵培养基进行放大，在最佳发酵条件下上罐培养，研究并分析各项生理指标。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪 论

1.1食用菌概述

1.1.1食用菌的研究及发展

1.1.2食用菌深层培养

1.2红汁乳菇的研究概况

1.2.1红汁乳菇在分类学上的位置

1.2.2红汁乳菇生态研究

1.2.3红汁乳菇生长培养研究

1.2.4红汁乳菇生理生化研究

1.3研究的目的、意义与内容

1.3.1研究目的及意义

1.3.2主要研究内容

第二章试验方法

2.1试验材料

2.1.1试验药品及原料

2.12试验菌种

2.1.3实验培养基

2.2试验器具

2.2.1试验仪器及设备

2.2.2试验工具

2.3.试验方法

2.3.1菌丝体的培养

2.3.2试剂的配制

2.3.3菌丝深层培养过程中的检测

2.4试验分析软件

第三章红汁乳菇发酵培养基的优化

3.1菌丝的形态特征观察

3.1.1培养菌丝的外观形态

3.1.2红汁乳菇菌丝体与子实体的微观特征比较

3.2发酵培养基单因素试验

3.2.1液体菌种的选取

3.2.2碳源对红汁乳菇深层发酵的影响

3.2.3碳源浓度对红汁乳菇深层发酵的影响

3.2.4氮源对红汁乳菇深层发酵的影响

3.2.5氮源浓度对红汁乳菇深层发酵的影响

3.2.6无机盐对红汁乳菇深层发酵的影响

3.2.7无机盐浓度对菌丝体生长的影响

3.3培养基成分的优化

3.3.1响应曲面分析试验设计

3.3.2二次回归拟合及方差分析

3.3.3试验结果的响应面分析与优化

3.3.4优化结果的验证

3.4小结

第四章红汁乳菇摇瓶液体发酵条件的研究

4.1摇瓶液体发酵条件单因素试验

4.1.1初始pH对红汁乳菇液体发酵的影响

4.1.2温度对红汁乳菇深层发酵的影响

4.1.3摇瓶液体菌种种龄对红汁乳菇深层发酵的影响

4.1.4接种量对红汁乳菇深层发酵的影响

4.1.5通气量对红汁乳菇深层发酵的影响

4.2响应面分析法优化红汁乳菇深层发酵条件

4.2.1 Box-Behnken实验设计

4.2.2 Box-Behnken实验结果

4.2.3二次回归拟合及方差分析

4.2.4发酵条件的响应面分析与优化

4.2.5优化结果的验证

4.3小结

第五章红汁乳菇发酵培养的生长状况研究

5.1红汁乳菇摇瓶发酵培养过程菌丝生长变化的形态观察

5.2红汁乳菇摇瓶发酵培养过程各种指标的检测

5.2.1红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中菌丝干重的变化

5.2.2红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中发酵液色度及粘度的变化

5.2.2红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中pH值的变化分析

5.2.3红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中氨基氮的变化

5.2.4红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中总糖及还原糖的变化

5.2.5红汁乳菇摇瓶发酵培养过程中酶活性的变化

5.3红汁乳菇发酵罐培养过程中菌丝生长动态观察

5.4发酵罐培养过程中出现问题的探讨

5.5小结

第六章结论与展望

结论

展望

硕士期间发表的论文

致 谢

参考文献