细菌纤维素产生菌的筛选、初步鉴定、培养基的优化及GDH基因缺失体的研究

摘要

细菌纤维素是由如木醋杆菌(Acetobacterxylium)等微生物利用蔗糖、果糖、葡萄糖等为碳源合成而来的超微纤维网，以纯纤维素的形式存在。与植物纤维比较，细菌纤维素具有纯度高、结晶度高、抗撕拉能力强以及生物适应性好等优点；作为一种新型生物材料，细菌纤维素在食品、医药、生物医学材料、造纸、精纺及化工等众多领域具有潜在的应用前景。 本文从腐烂水果中分离和筛选产纤维素的自然菌株，并进行了鉴定。用响应面法对培养基及培养条件进行了一系列的优化，为将来进一步开发和研究细菌纤维素打下基础。主要研究结果如下： 以LGI培养基为基本培养基从腐烂的梨中分离到一株产细菌纤维素菌株，命名为xws-05。通过根据形态、生长特性、菌落形态以及16SrDNA序列同源性比较，初步鉴定为木醋杆菌菌属(Acetobacterxylinum)。 采用Plackett-Burman设计法从11个因素中筛选出重要因素，再对初始浓度区域进行响应面分析，得到的最佳培养基为(﹪)：蔗糖10，酵母膏0.5，醋酸0.6，柠檬酸0.04，磷酸氢二钠0.5，硫酸铵0.5，醋酸钾0.05，CaCl20.04，MgCl20.26pH=6.0；培养条件为：培养温度30℃；接种量5﹪；装液量50ml/250ml 通过PCR扩增方法从xws-05菌株中克隆到一个葡萄糖脱氢酶基因片段，接着将该片段连接到pLARF质粒上，得到pLgdh，同样方法再将km基因连接到pLgdh，构建了重组质粒pLgkm。

目录

文摘

英文文摘

第一章绪论

第二章菌株的分离与鉴定

第三章细菌纤维素发酵培养基的优化

第四章xws-05葡萄糖脱氢酶基因缺失体的构建

结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间所发表的学术论文