X-连锁隐性遗传鱼鳞病患者的STS基因分析；118例孕妇G6PD缺乏症基因诊断的研究

摘要

本研究对118例孕妇进行G6PD生化检测和基因分析，两名分别来自江西和广东鹤山，其余116例均来自广东兴宁市。我们采用G6PD／6PGD比值法筛出酶活性降低者3例，酶活性正常115例。再联合应用聚合酶链反应(poly merase chain reaction，PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)及DNA测序技术对所有被检样本进行G6PD缺乏症基因诊断。在酶活性筛查降低的三个孕妇中，检测出c．1388 G>A突变，c．1376 G>T突变，和c．1388 G>A合并rs2230037+rs2071429突变杂合子各1例；酶活性正常的115例孕妇中检测出c．1376 G>T突变8例，c．1388 G>A突变1例，c．1376 G>T合并rs2230037+rs20714291突变1例。我们的实验结果显示，酶活性降低的孕妇都存在致病性基因突变，酶活性正常的孕妇中也有10例检测出致病性基因突变。最后为筛查出致病性突变的孕妇建立保健卡，指导防治的基本知识，有需要的孕妇采取产前干预措施。遗传病的确诊是开展遗传咨询和防治工作的基础，而目前临床上普通采用的G6PD缺乏症的生化筛查方法容易造成假阴性错误，尤其对于酶活性正常的女性杂合子的检出率不高。因此，对孕龄妇女尤其是G6PD缺乏症高发地区的妇女，应该从基因水平上诊断G6PD缺乏症，这对于G6PD缺乏症的预防工作，优生优育具有重要的意义。

目录

声明

X-连锁隐性传鱼鳞病患者的STS基因分析

摘要

前言

第1章实验材料

1.1研究对象

1.2主要试剂

1.3主要实验仪器

第2章实验方法

2.1 DNA的提取

2.2 PCR扩增

2.3变性高效液相色谱(DHPLC)分析

第3章实验结果

3.1患者1(家系1)皮肤病理切片诊断结果

3.2 PCR产物的琼脂糖电泳分析

3.3 PCR产物的DHPLC分析

3.4断裂点的确定

第4章讨论

4.1 STS基因缺失断裂点的初步定位

4.2本实验中STS基因缺失与国外研究结果的比较分析

4.3建立Gap-PCR技术确定基因缺失的断裂点

第5章结论

参考文献

118例孕妇G6PD缺乏症基因诊断的研究

摘要

前言

第1章实验材料

1.1研究对象

1.2主要试剂

1.3主要实验仪器

第2章实验方法

2.1 样本DNA的制备

2.2 PCR扩增

2.3 DHPLC分析

2.4测序

第3章实验结果

3.1生化方法筛查结果

3.2 DHPLC及DNA测序检测结果

第4章讨论

4.1女性开展G6PD缺乏症基因诊断的必要性

第5章结论

参考文献

致谢