染料荧光探针与蛋白质、核酸相互作用的研究

摘要

△该文提出以染料碱性品红和偶氮氯膦Ⅰ作为蛋白质的探针,碱性品红和铝试剂作为核酸探针.研究结果表明:1研究了以三苯甲烷类阳离子染料碱性品红(RL)与牛血清白蛋白(BSA)的结合模型,发现结合反应符合Pesavento提出的相分配模型,求得不同温度下RL与BSA相互作用的结合常数,依据热力学常数确定了RL与BSA之间的作用力类型为疏水作用力.△以三苯甲烷类阳离子染料碱性品红(RL)为荧光探针建立DNA的定量分析方法.△探究铝试剂在不同pH值下的光谱特征时,发现pH为4.04的Bntton-Robinson 缓冲介质中,铝试剂能与DNA形成复合物,荧光光谱发生紫移,且荧光强度与DNA的量呈线性关系.

目录

摘要

Abstract

第1章绪论

1.1引言

1.2蛋白质探针的类型及研究进展

1.3核酸探针的类型及研究进展

1.4展望

参考文献

第2章理论部分

2.1蛋白质与探针分子相互作用模型

2.2核酸与探针分子相互作用机理

2.3表观结合常数和热力学参数

2.4猝灭机理

参考文献

第3章实验部分

3.1实验仪器

3.2试剂

3.3实验方法

参考文献

第4章结果与讨论

4.1碱性品红与牛血清白蛋白的相互作用及其应用

4.1.1碱性品红的荧光光谱

4.1.2实验条件对结合反应的影响

4.1.3工作曲线

4.1.4共存物质的干扰

4.1.5样品的测定

4.1.6RL与BSA的相互作用的研究

4.1.7小结

参考文献

4.2碱性品红与DNA相互作用的研究

4.2.1碱性品红的荧光光谱

4.2.2实验条件的优化

4.2.3工作曲线

4.2.4干扰成分的影响

4.2.5样品的测定

4.2.6作用机理

4.2.7小结

参考文献

4.3偶氮氯膦(Ⅰ)与蛋白质的相互作用及分析应用

4.3.1荧光光谱

4.3.2实验条件的优化

4.3.3影响荧光强度的因素

4.3.4工作曲线

4.3.5样品的测定

4.3.6猝灭机理

4.3.7复合物形成常数及作用力的确定

4.3.8小结

参考文献

4.4铝试剂与核酸相互作用的研究

4.4.1荧光光谱

4.4.2试验顺序的影响

4.4.3缓冲液用量的影响

4.4.4铝试剂用量的影响

4.4.5离子强度的影响

4.4.6表面活性剂的影响

4.4.7核酸的工作曲线

4.4.8干扰离子的影响

4.4.9各种DNA样品的测定

4.4.10与一些经典方法的比较

4.4.11小结

参考文献

致谢

作者在读硕士期间发表的论文

硕士学位论文授权书