桉叶多酚对胡须鸡抗氧化性能和肉质品质的影响及机理研究

摘要

桉树在我国种植面积广阔，每年产生大量桉叶，桉叶在我国除部分用于提取桉叶精油外，其余都未加利用。本团队前期研究表明桉叶提取物具有很好的抗氧化活性，证明起抗氧化作用主要是多酚类物质。通过蛋鸡和肉猪实验，发现桉叶多酚具有提高机体抗氧化和改善肉质的性能。为了深入研究桉叶多酚在动物体内的作用，本文在前人基础上继续研究桉叶多酚对胡须鸡抗氧化性能和肉质品质的影响及机理研究。本文的主要研究内容和结果如下所示：
　　（1）实验原料选用湛江“广林九号”桉树叶，经粉碎、低温连续相变提取、浓缩喷雾干燥等方法，制得桉叶多酚。本次试验桉叶多酚中多酚含量31.70%±1.64%，其中5-甲氧基糠醛（0.63%）英国栎鞣花素（0.72%）、月见草素B（10.46%）以及1，2，3，4，6-五没食子酰基葡萄糖（1.21%）等成分达到质量标准。
　　（2）桉叶多酚对胡须鸡血清和肌肉抗氧化性能的影响。桉叶多酚对胡须鸡血清抗氧化影响如下：各组血清GSH-Px、T-SOD、T-AOC、MDA含量相差不大（p>0.05）。在胸肌肌肉中，0.6、0.9、1.2g/k g桉叶多酚组胸肌肌肉GSH-Px活力显著高于对照组（p<0.05），分别提高了4.59%、44.50%、24.65%；0.9g/k g桉叶多酚组GSH-Px活力显著高于阳性对照组（p<0.05），提高了66.52%。相对于对照组和阳性对照组，0.9g/k g桉叶多酚组胸肌肌肉MDA显著降低了25.40%、24.29%（p<0.05）。相对于对照组，腿肌肌肉中 GSH-Px活力和MDA含量均有显著变化（p<0.05），其中0.9、1.2g/kg桉叶多酚组腿肌肌肉GSH-Px活力显著提升了45.75%、58.72%，0.9 g/k g桉叶多酚组腿肌肌肉MDA含量显著降低了31.30%；桉叶多酚可以显著提高胡须鸡肌肉中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力，同时显著降低丙二醛值（MDA）含量，改善机体抗氧化能力。
　　（3）桉叶多酚对胡须鸡肉质品质的影响。桉叶多酚对胡须鸡料肉比、平均日增重以及平均日采食量等生长性能指标无显著影响（p>0.05）；桉叶多酚各实验组对肌肉滴水损失、胶原蛋白、pH无显著影响（p>0.05）。在肉色方面，桉叶多酚各实验组胡须鸡胸肌和腿肌肉色中L*（亮度）、b*（黄度）无明显变化（p>0.05）；此外，0.6 g/k g桉叶多酚组胸肌肌肉a*（红度）显著高于对照组（p<0.05），提高了23.40%；与对照组相比，0.6、0.9、1.2g/k g桉叶多酚组腿肌肌肉a*（红度）同样显著提高了24.52%、20.60%、23.07%（p<0.05）。在肌红蛋白组成方面，与阳性对照组相比，1.2g/k g桉叶多酚组显著提高胸肌肌肉中氧合肌红蛋白比例（p<0.05），提高了21.62%。在腿肌肌肉中，0.9g/k g桉叶多酚组肌红蛋白含量显著高于对照组，提高了25.10%（p<0.05）。
　　在肌肉营养成分和脂肪酸组成方面，桉叶多酚各试验组对肌肉水分含量、蛋白质含量、灰分含量无显著影响（p>0.05）。0.9 g/k g桉叶多酚组对胡须鸡胸肌、腿肌肌内脂肪均有显著提高作用（p<0.05），提高比例分别为34.50%和30.33%。0.6 g/k g桉叶多酚组胡须鸡腿肌肌肉油酸相对于对照组显著提高了19.07%（p<0.05），0.9 g/k g桉叶多酚组腿肌肌肉中亚麻酸的相对含量显著高于对照组和阳性对照组（p<0.05），提高了32.63%和37.42%；与阳性对照相比，0.6 g/k g桉叶多酚组肌肉中饱和脂肪酸含量显著下降、不饱和脂肪酸显著增高（p<0.05），不饱和脂肪酸最高增加了11.95%；
　　在风味成分方面，腿肌肌肉中0.9g/k g桉叶多酚组鸟苷酸含量显著高于对照组，提升了25.93%（p>0.05）；0.6 g/k g桉叶多酚组胸肌甘氨酸含量显著高于对照组和阳性对照组，均提高了8.81%（p<0.05）。相比于对照组，0.6g/k g桉叶多酚组和0.9 g/k g桉叶多酚组胸肌组氨酸含量显著提高了13.24%和13.58%（p<0.05）；1.2 g/k g桉叶多酚组腿肌苯丙氨酸含量显著提高了8.50%（p<0.05）；0.9g/k g桉叶多酚+阳性对照组腿肌组氨酸显著高于对照组，提高了13.85%（p<0.05）；
　　桉叶多酚可以改善肉色a*值，提高肌肉氧合肌红蛋白比例和肌红蛋白的含量，显著改善肉色；提高肌肉肌内脂肪含量，改善脂肪酸组成；同时，桉叶多酚提高肌肉中鸟苷酸、甘氨酸、组氨酸以及苯丙氨酸含量，改善肉质品质风味。
　　（4）基于iTRAQ和RNA-seq技术对日粮添加桉叶多酚胡须鸡肌肉差异表达基因的筛选与注释。桉叶多酚组A0A0A0MQ61、GST、APOA4基因以及超氧化物歧化酶和过氧化物酶显著上调，能快速清除体内脂质代谢等产生的自由基，增强机体抗氧化性能；此外谷胱甘肽代谢通路中控制谷胱甘肽转移酶、谷胱甘肽水解酶、γ-谷酰基转移酶基因的表达量显著增高，提高机体中谷胱甘肽表达量，显著提高机体抗氧化能力，这与生理指标中GSH-Px活力显著提高相一致。桉叶多酚组肉色a*、肌红蛋白含量显著提高，这与本次组学中发现的代谢通路he me b ind ing、he mo glob in co mp le x以及he mo glob in b ind ing密切相关，同时肉色相关的基因Mb显著上调表达，血红蛋白和肌红蛋白在肌肉内的含量受到基因或者特定蛋白调控，引起肉色的变化。长链脂肪酸运输、脂肪酸降解等代谢通路的变化引起肌肉中脂肪酸组成的改变；与氨基酸相关的代谢通路包括精氨酸和脯氨酸代谢等。

目录

声明

论文所用缩写及中英文对照表

1 前言

1. 1桉树和桉树叶成分概况

1. 2中草药饲料添加剂研究概况

1. 3桉叶提取物作为饲料添加剂研究概况

1. 4研究目的和意义

1. 5研究内容

2. 1实验材料

2. 2 实验试剂

2. 3 主要仪器与设备

2. 4 技术路线

2. 5 实验方法

3 结果与分析

3. 1 桉叶多酚质量分析

3. 2桉叶多酚对胡须鸡生长性能的影响

3. 3桉叶多酚对胡须鸡血清抗氧化的影响

3. 4 桉叶多酚对胡须鸡肌肉抗氧化的影响

3. 5桉叶多酚对胡须鸡肌肉肉质指标的影响

3. 6蛋白组学结果

3. 7转录组学结果

4 讨论

4. 1 桉叶多酚对肉鸡生长性能的影响

4. 2 桉叶多酚对胡须鸡血清和肌肉抗氧化性能的影响

4. 3 桉叶多酚对胡须鸡肌肉滴水损失、pH和胶原蛋白含量的影响

4. 4 桉叶多酚对胡须鸡肌肉肉色的影响

4. 4 桉叶多酚对胡须鸡肌肉营养成分和脂肪酸组成的影响

4. 5 桉叶多酚对胡须鸡肌肉风味成分的影响

4. 6 基于蛋白组学和转录组学探究桉叶多酚与抗氧化性能和肉质变化的机理

4.7 结论

4.8 创新点

4.9 下一步计划

致谢

参考文献

附录Ⅰ期刊论文和学术交流

附录Ⅱ动物实验相关照片