具有抑菌活性成分中草药的筛选及防腐保鲜应用机理研究

摘要

该论文用80﹪的乙醇对30种中草药进行了提取,得到粗提物.利用滤纸片扩散法和双层平板法测试了30种提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、黑曲霉、桔青霉、荔枝霜疫霉菌、牛奶酸败菌七种供试菌的抑制作用.同时采用孢子悬液点接法和孢子液法测试提取物对黑曲霉和荔枝霜疫霉菌的抑菌率及对霉菌分生孢子萌发的抑制率.初步筛选筛选出抑菌效果较好和抑菌谱较宽的水菖蒲、丁香、高良姜、桂皮、大黄五种提取液，其对霉菌菌丝的生长和分生孢子萌发表现强烈的抑制作用，抑菌率保持在85﹪以上.水菖蒲、丁香、桂皮三种提取原液对荔枝霜疫霉菌抑制达到100﹪，与0.2﹪苯甲酸钠对照相当.五种提取液对供试菌MIC测定的结果表明丁香提取液TW-15效果最好.用五种提取液进行1：1：1配伍的10种配伍液对其中供试菌的MIC值测定结果表明配伍液PW-6是其中效果最好的配伍，对各供试菌均表现很强的抑制作用，配伍后对荔枝霜疫霉菌的MIC值相对于TW-15降低了一倍.对丁香提取物TW-15和配伍液PW-6的理化性质初步研究结果表明：PW-6对荔枝霜疫霉菌的抑菌活性在对光照、温度、药效持续时间和保存时间测试上均优于TW-15，两种最佳抑菌pH为6;丁香提取液TW-15适用温度为低于60℃，而温度对配伍液PW-6影响不显著;光照对两种提取物的抑菌效果影响皆不显著.利用丁香提取液TW-15和配伍液PW-6两种提取液对青梨、葡萄和荔枝三种水果进行保鲜实验.实验结果表明：提取液在降低失重率、维持果蔬营养成分上效果明显，均优于未经保鲜液处理的对照.且配伍PW-6保鲜效果也要好于单一提取液TW-15.提取物在七天内对荔枝果皮表面霜疫霉菌的生长有明显的抑制作用.根据微生物呼吸抑制实验原理，测试丁香提取液TW-15对啤酒酵母呼吸途径的抑制作用，通过比较其与碘乙酸、丙二酸、磷酸钠三种典型呼吸途径抑制剂的重叠率，其与典型抑制剂丙二酸的重叠率为32.5﹪，证明丁香提取液TW-15的抑菌机理是抑制TCA呼吸途径.

目录

文摘

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第一章绪论

1.1食品防腐剂的应用与研究

1.2从植物中寻找和制备天然食品防腐剂

1.3植物提取物研究进展

1.3.1理论基础

1.3.2有潜在杀菌活性的植物提取物的筛选及生物活性测定

1.4荔枝霜疫霉菌的生物学特性及防治研究现状

1.4.1病原

1.4.2症状

1.4.3防治方法

1.5具有生物活性的化合物的分离和结构鉴定

1.6天然抗菌成分与分子结构特征关系的研究

1.7天然防腐剂开发与应用

1.8本研究课题的立题背景、研究意义和主要研究内容

第二章具有抑菌活性中草药的筛选实验研究

2.1引言

2.2试验材料与仪器

2.2.1试剂

2.2.2主要仪器

2.2.3菌种

2.2.4培养基

2.2.5供筛选中草药

2.3试验方法

2.3.1植物提取物母液的制备

2.3.2供试菌液的制备

2.3.3细菌、酵母和霉菌生长抑制试验

2.3.4提取物对供试菌MIC值的测定

2.3.5孢子悬液点接法测试抑菌率

2.3.6孢子液法测试提取物对霉菌的分生孢子萌发的抑制

2.3.7配伍提取物抑菌实验

2.3.8不同提取溶剂及试剂对提取物活性的影响试验

2.3.9提取液稳定性的测定

2.4结果与讨论

2.4.1菌悬液的制备

2.4.2中草药提取液对供试细菌、酵母、霉菌生长抑制试验

2.4.3有抑菌活性中草药提取物对供试菌的MIC值测定

2.4.4配伍提取物对供试细菌、酵母和霉菌的生长抑制实验

2.4.5不同提取溶剂及试剂对提取物活性的试验结果

2.4.6丁香乙醇提取液TW-15和配伍液PW-6的理化性质的初步研究

2.4.7讨论

2.5本章小节

第三章中草药提取液在果蔬保鲜中的应用研究

3.1引言

3.2试验材料与试验仪器

3.2.1供试中草药及果蔬

3.2.2试剂

3.2.3仪器

3.3试验方法

3.3.1测定法

3.3.2失重率和腐果率的测定

3.3.3样品中水分含量的测定

3.3.4样品酸度的测定

3.3.5样品总糖的测定

3.3.6样品维生素C含量的测定

3.3.7微生物指标的测定

3.3.8保鲜液的制备

3.3.9保鲜方法

3.3.10测定条件

3.4试验结果与讨论

3.4.1青梨保鲜试验结果

3.4.2青梨保鲜试验结果分析

3.4.2葡萄保鲜试验

3.4.3荔枝防霉保鲜实验

3.4.4关于提取液的安全性讨论

3.5本章小节

第四章丁香乙醇提取物TW-15和配伍液PW-6主要活性物质的分离和结构鉴定

4.1引言

4.2试验材料与仪器设备

4.2.1试验试剂

4.2.2仪器设备

4.3实验方法

4.3.1抑菌活性试验

4.3.2提取物TW-15有效成分的分离纯化方法

4.3.3化学定性

4.3.4紫外吸收光谱分析

4.3.5红外光谱分析

4.3.6高效液相色谱分析方法

4.4试验结果及分析

4.4.1丁香抑菌成分的提取及丁香油各组分分离

4.4.2丁香乙醇提取物TW-15及配伍液PW-6中丁香酚成分的定性鉴定

4.4.3丁香乙醇提取物TW-15有效成分的分离纯化

4.3.4紫外扫描结果及分析

4.3.5高效液相色谱分析

4.3.6红外扫描结果及分析

4.3.7讨论

4.4本章小节

第五章抑菌机理研究

5.1引言

5.2试验材料与仪器设备

5.2.1供试菌种

5.2.2试验仪器

5.3实验方法

5.3.1微生物呼吸抑制实验原理

5.3.2实验步骤

5.4试验结果及讨论

5.4.1丁香乙醇提取液TW-1 5对啤酒酵母呼吸途径的抑制

5.4.2结果与讨论

5.5本章小节

结论与展望

参考文献

致谢