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修饰多糖的抗氧自由基活性及其与DNA结合机理的荧光法研究

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第一章绪论

1.1多糖的种类

1.2多糖的物理性质

1.3多糖的结构

1.4多糖的提取分离

1.4.1提取溶剂

1.4.2常规步骤

1.4.3高新技术在多糖的提取分离中的应用

1.5多糖的分子量测定

1.6多糖的结构分析

1.6.1组成单糖的成分分析

1.6.2糖链连接方式确定

1.6.3糖苷键构型分析

1.6.4计算机辅助寡糖和多糖的结构分析

1.7多糖的的生物学功能

1.7.1调节免疫功能

1.7.2抗病毒、抗肿瘤活性

1.7.3抗衰老

1.7.4降血脂

1.7.5抗凝血作用

1.7.6降血糖作用

1.7.7抗溃疡作用

1.8多糖的化学修饰

1.8.1化学修饰和修饰剂

1.8.2影响修饰反应因素

1.8.3修饰反应的设计

1.8.4修饰多糖的构效关系

1.9荧光探针法表征DNA与其靶向分子的相互作用

1.10本文几种生物多糖研究现状

1.10.1壳聚糖

1.10.2螺旋藻多糖

1.10.3沙棘多糖

1.10.4褐藻多糖

1.11本论文研究的背景、目的、内容

1.11.1研究背景

1.11.2研究目的

1.11.3研究内容

1.11.4主要技术路线

第二章多糖的提取与分离

2.1实验部分

2.1.1仪器与材料

2.1.2实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1螺旋藻多糖的提取工艺研究

2.3.2沙棘多糖的提取分离

2.3.3褐藻糖胶粗多糖的提取分离与组成分析

2.4小结

第三章多糖的化学修饰

3.1实验部分

3.1.1主要仪器和试剂

3.1.2实验方法

3.2结果与讨论

3.2.1壳聚糖的化学修饰

3.2.2螺旋藻多糖的硫酸酯化

3.2.3褐藻糖胶级分HDⅡ的硫酸化修饰

3.3小结

第四章多糖的体外抗氧自由基作用研究

4.1实验部分

4.1.1主要材料与仪器

4.1.2抗氧化能力测定方法

4.2结果与讨论

4.2.1螺旋藻多糖及其硫酸酯化物清除氧自由基作用

4.2.2不同沙棘多糖对氧自由基清除率影响的测定

4.2.3褐藻多糖HDⅡ、HDSⅡ的清除氧自由基作用

4.3氧自由基清除机理探讨

4.4本章小结

第五章光谱法研究硫酸酯化壳聚糖与DNA的作用机理

5.1实验部分

5.1.1主要仪器与试剂

5.1.2实验方法

5.2结果与讨论

5.2.1探针EB/DNA荧光光谱和测量条件

5.2.2 CT-H、CT-L对DNA紫外光谱的影响

5.2.3 CT-H、CT-L对碱变性曲线的影响

5.2.4 CT-H和CT-L对EB/DNA体系吸收光谱的影响

5.2.5 CT-H、CT-L对EB/DNA体系荧光强度的影响

5.2.6 Mg2+及离子强度对CT、CT-H和CT-L存在时EB/DNA体系If的影响

5.2.7 CT-H、CT-L对EB/DNA体系荧光猝灭

5.3小结

第六章壳聚糖金属离子配合物与DNA的作用机理研究

6.1实验部分

6.1.1材料与仪器

6.1.2实验方法

6.2结果与讨论

6.2.1 CT-Ms对DNA紫外吸收光谱的影响

6.2.2 CT-Ms对碱变性(pHb)曲线的影响

6.2.3不同CT-Ms对热变性曲线的影响

6.2.4 CT-Ms对EB/DNA体系荧光猝灭方式的判断

6.2.5 CT-Ms存在时盐效应对EB/DNA体系荧光强度的影响

6.2.6壳聚糖金属离子配合物浓度对EB/DNA体系荧光强度的影响

6.3结论

第七章靶向分子羧甲基多糖与DNA作用研究

7.1实验部分

7.1.1主要仪器与试剂

7.1.2实验方法

7.2结果与讨论

7.2.1羧甲基多糖存在下荧光光谱

7.2.2羧甲基多糖与DNA作用常数测定

7.2.3修饰多糖与DNA作用强弱的重要尺度—作用常数D

7.2.4羧甲基多糖对DNA紫外吸收光谱的影响

7.3本章小结

结论与展望

参考文献

攻读博士学位期间发表论文

致谢

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摘要

该文以典型的动物多糖、植物多糖和藻类多糖(壳聚糖、螺旋藻多糖、沙棘多糖和褐藻多糖)为对象系统地研究了它们的高效提取技术和不同分级方法以及化学修饰改性,并通过螺旋藻多糖、沙棘多糖和褐藻多糖及其硫酸酯化产物清除氧自由基能力的测试以及荧光法对靶向分子硫酸化壳聚糖、羧甲基壳聚糖、壳聚糖金属离子配合物与DNA作用的考察,进一步探讨了多糖、修饰多糖分子在抗氧化、抗肿瘤、抗癌等方面与基因DNA的作用机理,揭示了不同生物多糖的结构-活性关系.主要内容如下:(1)多糖的提取分离及其强化技术研究;(2)多糖的化学修饰;(3)多糖清除活性氧自由基研究;(4)研究靶向分子与DNA的作用机理.

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