沉香茶保护DNA氧化损伤的活性及其机制研究

摘要

目的：以沉香茶为对象，考察其主要成分的提取分离工艺进行，探索沉香茶保护DNA氧化损伤的活性及作用机制，并对其保护DNA氧化损伤的活性成分进行研究。
　　方法：沉香茶的的提取及芫花素的分离：以甲醇为溶剂，采用索式提取器提取12 h，将滤液减压蒸馏得到流浸膏。乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩至恒重，再通过多次硅胶柱层析，分离纯化得到芫花素，并用HPLC等现代仪器对化合物结构进行鉴定和含量测定。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的研究：以沉香茶对?OH所致DNA损伤修复的作用，来表征沉香茶修复保护DNA氧化损伤活性。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的机制研究：研究沉香茶保护DNA氧化损伤的机制主要通过研究沉香茶抗氧化活性来进行。主要指标有DPPH?，ABTS+?，?O2-，?OH，还原能力（Fe3+和Cu2+），脂质过氧化，金属络合能力（Fe2+和Cu2+）。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的主要有效成分研究：以没食子酸为标准品，采用福林试剂法测定沉香茶甲醇提取物中多酚含量；以芦丁为标准品，采用硝酸铝-亚硝酸钠-氢氧化钠法测定沉香茶甲醇提取物中总黄酮含量；反相高效液相法定性测定沉香茶中主要的黄酮类成分，并采用DPPH?，ABTS+?，?O2-，还原能力（Fe3+和Cu2+），金属络合能力（Fe2+和Cu2+）法，研究沉香茶中主要有效成分的活性。
　　结果：采用甲醇提取，结合硅胶柱层析分离纯化得到的单体化合物，经HPLC鉴定，证明为芫花素，外观性状，溶解性都与文献报道相符，沉香茶甲醇提取物中芫花素含量达到6.89±0.08 mg/g。沉香茶对于DNA体内氧化损伤的保护作用呈现出量效关系， IC50值为1.07±0.10 mg/mL，这表示沉香茶对于DNA体内氧化损伤具有非常有效的修复作用。沉香茶有保护DNA氧化损伤的活性，主要通过清除体系中的自由基、络合体系中的过渡金属离子这两种途径实现的。沉香茶抗氧化的物质基础是多酚（157.41±6.51 mg GAE/g）中的黄酮（150.80±4.79 mg/g）类成分，芫花素是沉香茶中含量最大的黄酮，而木犀草素是最主要的抗氧化有效成分。
　　结论：沉香茶具有保护DNA氧化损伤的活性，这种活性主要通过清除体系中的自由基、络合体系中的过渡金属离子这两种途径实现的；而自由基清除又是通过供氢原子或供电子实现的。沉香茶的这种作用主要来自于内含的黄酮，尤其是木犀草素。

目录

声明

引言

第一章 文献综述

1.1 化学成分

1.2 药理作用

1.2.1 抗氧化作用

1.2.2 镇痛作用

1.2.3 抗炎作用

1.2.4 抗肿瘤作用

1.2.5 泻下作用

1.2.6 止血作用

1.2.7 推进小肠运动

1.3 脱氧核糖核酸（DNA）简介

1.4 自由基学说与DNA氧化损伤

1.4.1 自由基学说

1.4.2 自由基对DNA氧化损伤的机理

1.4.3 DNA氧化损伤与疾病

1.4.4 抗氧化性能的评价方法研究进展

1.5 植物抗氧化物质基础研究进展

1.6 展望

1.7 本课题的研究基础

第二章 实验研究

2.1 沉香茶甲醇提取物的制备及芫花素的分离

2.1.1 仪器与材料

2.1.2 实验方法

2.1.3 结果

2.1.4 讨论

2.2 沉香茶对DNA氧化损伤的保护作用研究

2.2.1 仪器与试剂

2.2.2 实验方法

2.2.3 结果

2.2.4 讨论

2.3 沉香茶保护DNA氧化损伤的作用机制研究

2.3.1 仪器与材料

2.3.2 实验方法

2.3.3 结果

2.3.4 讨论

2.4 沉香茶保护DNA氧化损伤主要有效成分研究

2.4.1 仪器与材料

2.4.2 实验方法

2.4.3 结果

2.4.4 讨论

结语

参考文献

附录

在校期间发表论文情况

致谢