目的:通过检测不同浓度苗药金乌健骨方含药血清冻干粉对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte of Rheumatoid Arthritis，FLS of RA)的抑制率、促进FLS of RA的凋亡率及调控FLS of RA中NF-κB/P65、IKK-α及IKK-β的表达水平，分析不同浓度苗药金乌健骨方含药血清冻干粉对FLS of RA的影响，探讨苗药金乌健骨方含药血清作用于FLS of RA的机制。 方法:按照纳入标准在临床上收集8例RA患者关节置换后的滑膜组织，在体外对所收集的标本进行培养，将培养出的细胞随机分为空白对照组，兔血清对照组，苗药金乌健骨方含药血清冻干粉高、中、低剂量组，雷公藤对照组和醋酸泼尼松对照组，用不同浓度的苗药金乌健骨方含药血清冻干粉对FLS of RA进行干预后，采用MTT检测法观察苗药金乌健骨方含药血清不同浓度药物组间FLSof RA的抑制率、用流式细胞仪记录各组间FLS of RA的凋亡率，采用WesternBlotting(WB)法检测苗药金乌健骨方对FLS of RA中NF-κB/P65、IKK-α及IKK-β表达水平的影响。 结果:1.形态学改变:与空白对照组相比，随着苗药金乌健骨方含药血清浓度升高，FLS of RA形态由梭形逐渐变圆，体积缩小，细胞间隙逐渐增宽，细胞贴壁能力减弱，核边集，胞质丢失形成突起。 2.MTT法检测:随着苗药金乌健骨方含药血清冻干粉干预浓度的升高，各浓度血清干预组的OD值逐渐下降，各组浓度含药血清对FLS of RA的抑制均有显著差异，具有统计学意义(P＜0.05)。其中苗药金乌健骨方8倍含药血清组对FLS of RA的抑制最明显(P＜0.01)。 3.流式细胞仪检测:苗药金乌健骨方含药血清冻干粉各组均可促进FLS of RA的凋亡并且随着浓度的升高，凋亡率越高(P＜0.05)，其中苗药金乌健骨方高、中剂量含药血清组的凋亡率均高于雷公藤对照组，有显著性差异，具有统计学意义(P＜0.05)。与泼尼松对照组对比，苗药金乌健骨方高、中剂量组诱导的凋亡率与其之间无显著性差异，不具有统计学意义(P＜0.05)。 4.WB检测法:与空白对照组相比，随着苗药金乌健骨方含药血清浓度的增加，IKK-α、IKK-β及NF-κ B/P65的表达水平得到显著下调的作用(P＜0.05);与雷公藤对照组相比，各浓度苗药金乌健骨方含药血清组IKK-α、IKK-β及NF-κ B/P65的表达水平更低，具有统计学意义(P＜0.05);相较于泼尼松对照组而言，苗药金乌健骨高剂量含药血清组IKK-α、IKK-β及NF-KB/P65表达水平更低，具有统计学意义(P＜0.05)。 结论:苗药金乌健骨方含药血清能抑制FLS of RA的增殖、诱导FLS of RA的凋亡及下调体外FLS ofRANF-κB/P65、IKK-β及IKK-α的表达这可能是其诱导FLS of RA的凋亡，减轻RA患者临床症状的作用机制之一。
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