金乌健骨汤对类风湿关节炎模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号影响的研究

摘要

目的:1、研究金乌健骨汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen inducedarthritis，CIA)模型大鼠足趾肿胀度、关节炎指数、滑膜及软骨病理改变的影响。2、研究金乌健骨汤对CIA大鼠血清中致炎因子TNF-α、IL-1、IL-1β的调节作用。3、研究金乌健骨汤对CIA大鼠关节滑膜细胞炎性启动因子核周因子-κ出(NF-KB)调控作用，并探讨金乌健骨汤治疗类风湿关节炎(RA)可能的作用机制。
　　方法:将60只5周龄Wistar雌性大鼠，随机分为空白对照组，模型对照组对照组，雷公藤多苷对照组，金乌健骨汤低剂量组，金乌健骨汤中剂量组，金乌健骨汤高剂量组。建立Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型，测量大鼠关节肿胀度，采用关节炎指数积分法评定关节炎指数，取关节滑膜及部分软骨进行病理检测，观察滑膜细胞和血管的增生，滑膜层及滑膜下层淋巴细胞浸润和软骨的增生及破坏等情况。采用ELISA法检测CIA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β表达并研究金乌健骨汤的调控作用。用蛋白印迹法(Western blot)检测CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κ B/P65、IκBα信号蛋白的活性及金乌健骨汤的调控作用。
　　结果:1、金乌健骨汤高、中、低三个剂量治疗组及雷公藤多苷对照组对CIA大鼠滑膜重量、足趾肿胀度、关节炎指数均有不同程度下降，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01)，滑膜及软骨病理改变均有不同程度的改善。2、金乌健骨汤高、中、低三个剂量治疗组及雷公藤多苷对照组可不同程度下调CIA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β的表达，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01);3、金乌健骨汤高、中、低三个剂量治疗组及雷公藤多苷对照组可不同程度下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κ B/P65、IκBα的表达，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。4、金乌健骨汤高、中剂量组及雷公藤多苷对照组对各个检测指标的改善优于金乌健骨汤低剂量组，有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)，金乌健骨汤高、中剂量组与雷公藤多苷对照组比较，无显著性差异(P＞0.05)。
　　结论:1、CIA大鼠模型对照组血清IL-1、IL-1β、TNF-α及NF-κ B/P65、IκBα的表达均明显升高，说明可能参与了关节滑膜炎症及关节破坏的过程。2、金乌健骨汤能够改善CIA大鼠关节滑膜炎症及病理破坏。3、金乌健骨汤可显著下调CIA大鼠血清致炎因子TNF-α、IL-1、IL-1β表达，降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κ B/P65、IκBα信号蛋白活性，这可能是该方治疗RA的作用机制之一。