鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化及其生物活性研究

摘要

本研究以鲍鱼菇(Pleurotusabalonus)子实体为材料，经热水提取，95％乙醇沉淀，Sevag法去蛋白，DEAE—sephadexA-25柱层析和SephadexG—100凝胶柱层析纯化，获得水溶性多糖PPA-2。电泳法鉴定PPA-2为均一组分，红外光谱和紫外光谱扫描结果表明，PPA-2具有多糖的特征吸收峰，不含核酸和蛋白质，SephadexG—100分子筛层析测得PPA-2相对分子质量约为23KD。 同时对PPA-2的生物活性进行了初步研究。本文以瘤重大小判断PPA-2抑瘤效果，以免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素IgM水平及迟发型超敏反应(DTH)四项免疫指标检测PPA-2对免疫功能的影响。 抑瘤试验结果表明：抑瘤率随PPA-2浓度的增大而增大。低剂量组(50mg/kg)多糖抑瘤效果不显著，中剂量组(75mg/kg)、高剂量组(100mg/kg)多糖表现出非常显著的抑瘤作用(P＜0.01)。说明一定剂量的鲍鱼菇子实体多糖PPA-2能够抑制小白鼠S180肿瘤生长。 免疫指标检测结果表明：PPA-2≥50mg/kg能提高荷瘤小白鼠的脾指数(P＜0.01，P＜0.001)，PPA-2≥75mg/kg能提高正常小白鼠的脾指数(P＜0.05，P＜0.01)，PPA-2≥50mg/kg能提高免疫功能低下小白鼠的脾指数(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001)；PPA-2≥50mg/kg能提高正常小白鼠巨噬细胞吞噬率(P＜0.05，P＜0.01)及吞噬指数(P＜0.05，P＜0.001)；PPA-2≥50mg/kg能提高正常小白鼠血清溶血素IgM水平(P＜0.05)；PPA-2≥75mg/kg能增强正常小白鼠迟发型超敏反应(P＜0.05、P＜0.001)。说明一定剂量的鲍鱼菇子实体多糖PPA-2能够增强小白鼠的非特异性及特异性免疫功能。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章绪论

1.1 食(药)用真菌多糖的提取、分离纯化

1.1.1 食(药)用真菌多糖的提取

1.1.2食(药)用真菌多糖的分级纯化

1.1.3食(药)用真菌多糖的纯度鉴定

1.2 食(药)用真菌多糖的测定

1.2.1 食(药)用真菌多糖相对分子质量的测定

1.2.2食(药)用真菌多糖含量的测定

1.3 食(药)用真菌多糖的生物活性

1.3.1 提高免疫功能

1.3.2抗肿瘤作用

1.3.3抗衰老作用

1.3.4.降血糖、降血压、降血脂活性

1.3.5健胃保肝

1.4 食(药)用真菌多糖的结构及其构效关系

1.4.1多糖的化学结构

1.4.2多糖的构效关系

1.5 食(药)用真菌多糖的研究展望

1.6 鲍鱼菇的研究概况

1.7 本研究的意义和内容

第2章鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化及理化性质

2.1 实验材料

2.1.1材料

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化

2.2.2 PPA-2的糖含量测定

2.2.3 PPA-2的相对分子质量的测定

2.2.4 PPA-2的理化性质定性分析

2.2.5 PPA-2的紫外光谱分析

2.2.6 PPA-2的红外光谱分析

2.3 结果与分析

2.3.1.鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化

2.3.2 PPA-2的糖含量

2.3.3 PPA-2相对分子质量的测定

2.3.4 PPA-2的理化性质

2.3.5 PPA-2的紫外光谱分析

2.3.6 PPA-2的红外光谱分析

2.4 讨论

2.5 小结

第3章鲍鱼菇子实体多糖PPA-2抗肿瘤活性和对免疫功能的影响

3.1 实验材料

3.1.1材料

3.1.2实验动物

3.1.3主要药品

3.1.4主要试剂的配制

3.1.5主要仪器

3.2 实验方法

3.2.1 抑瘤试验及荷瘤小白鼠免疫器官指数测定

3.2.2正常小白鼠免疫器官指数测定

3.2.3免疫功能低下小白鼠免疫器官指数测定

3.2.4正常小白鼠巨噬细胞吞噬功能的测定

3.2.5 正常小白鼠血清溶血素半数溶血值(HCSO)的测定

3.2.6 二硝基氟苯诱导的正常小白鼠迟发型超敏反应(DTH)的测定

3.3 结果与分析

3.3.1 PPA-2的抑瘤活性及对荷瘤小白鼠免疫器官指数的影响

3.3.2 PPA-2对正常小白鼠免疫器官指数的影响

3.3.3 PPA-2对免疫功能低下小白鼠免疫器官指数的影响

3.3.4 PPA-2对正常小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

3.3.5 PPA-2对正常小白鼠体内抗体生成的影响

3.3.6 PPA-2对正常小白鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响

3.4讨论

3.5 小结

第4章结论

4.1 研究结果

4.2 本论文的创新点

4.3展望

参考文献

攻读学位期间主要科研成果

致谢