脂氧素对脂多糖诱导巨噬细胞炎症相关因子的影响及机制的研究

摘要

目的：研究脂氧素对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7中相关炎症因子（TNF-α，COX-2/PGE2）和TIR4受体的影响，并进一步探讨其内在分子机制。 方法：以1μg/ml的LPS刺激体外培养的RAW264.7细胞作为炎症模型，细胞分成四组：（1）空白组：用PBS处理作为空白对照组；（2）LPS处理组：1μg/ml LPS处理；（3）LPS+脂氧素组：1μg/ml LPS加100ng/ml的脂氧素A4共同处理；（4）LPS+脂氧素+ZnPPIX组：1μg/ml LPS加100ng/ml的脂氧素A4和100μM ZnPPIX共同处理。各组细胞在不同处理因素作用24小时后，酶联免疫法测定上清中TNF-α，IL-10和PGE2浓度；免疫印迹法检测细胞COX-2和HO-1的蛋白表达量；分光光度计分析HO-1的活性；流式细胞仪检测细胞膜上TLR4。 结果： 1.LPS刺激细胞后，TNF-α的生成量明显增加；脂氧素A4却抑制LPS诱导细胞产生的TNF-α；而ZnPPIX逆转脂氧素A4对LPS诱导的TNF-α的产生的抑制作用。 2.LPS刺激细胞后，IL-10的生成量增加；脂氧素A4进一步增加IL-10的生成量；ZnPPIX干预后明显减少脂氧素A4和LPS诱导巨噬细胞产生的IL-10。 3.LPS刺激后，COX-2蛋白表达明显上调，细胞上清液中PGE2的生成量增加；脂氧素A4抑制LPS诱导的COX-2蛋白表达和PGE2的产生；ZnPPIX逆转脂氧素A4对LPS诱导的COX-2表达和PGE2的产生的抑制效应。 4.LPS刺激后，HO-1蛋白表达和激活增加；脂氧素A4进一步增强HO-1蛋白表达和激活；ZnPPIX可明显减弱脂氧素A4对HO-1的激活，但却不影响HO-1的表达。 5.LPS刺激可降低巨噬细胞膜上TLR4受体的含量；脂氧素A4进一步降低巨噬细胞膜表面TLR4受体含量；ZnPPIX可逆转脂氧素A4对巨噬细胞膜表面TLR4受体的抑制作用。 结论：脂氧素A4可抑制LPS诱导的巨噬细胞中致炎介质TNF-α，COX-2，及PGE2的生成，同时也减少巨噬细胞膜上TLR4受体的含量、促进IL-10的产生，这种效应在一定程度上是通过上调HO-1表达和活性的来实现。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英汉缩略语名词对照

声明

前言

1材料和方法

1.1材料

1.2实验方法

1.3统计学处理

2结果

2.1不同处理组对小鼠巨噬细胞TNF-α的生成量的影响

2.2不同处理组对小鼠巨噬细胞IL-10的生成量的影响

2.3不同处理组对小鼠巨噬细胞COX-2蛋白表达和PGE2生成量的影响

2.4不同处理组对小鼠巨噬细胞HO-1蛋白表达和活性的影响

2.5不同处理组对小鼠巨噬细胞膜表面TLR4含量的影响

3讨论

参考文献

文献综述 脂氧素及其受体对炎症消退的作用

致谢

攻读硕士期间发表的论文