抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后气道反应的影响

摘要

第一部分抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后气道炎症及气道高反应的影响
　　 目的：探讨咽部菌群失调对RSV感染后气道炎症及气道高反应的影响。
　　 方法：将3周龄雌性BALB/c分为4组，分别为:空白对照组，抗生素组，RSV感染组及RSV感染+抗生素组。在感染后第4天，随机抽取小鼠将其肺匀浆进行培养及PCR检测，对RSV感染进行验证。在感染后第8天，取所有小鼠的咽拭子进行培养并PCR测序验证。感染后第8天及第15天对各组小鼠进行肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞分类计数、病理切片H&E染色及气道高反应(AHR)检测。
　　 结果：肺匀浆培养结果及PCR测序结果证明RSV成功感染小鼠。PCR及测序结果证明抗生素的使用造成了小鼠咽部菌群失调，而单独RSV感染不能影响气道菌群。RSV感染后第8天，BALF中炎症细胞明显增多，肺部病理损伤加重，无AHR。在感染后第15天，BALF中炎症细胞较感染后第8天减少，肺部病理损伤减轻，无AHR。RSV感染十抗生素组与RSV感染组相比，未在感染后第8天产生任何差异，但在感染后第15天激发出AHR。在此两个时间点，上述检测在抗生素组和空白对照组之间未见差异。
　　 结论：RSV感染后急性期肺部炎症加重，在此基础上抗生素致咽部菌群失调可以在后期造成AHR。抗生素致咽部菌群失调会激发RSV感染后AHR。
　　 第二部分抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部Treg细胞的影响
　　 目的：探讨抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部Treg细胞的影响。
　　 方法：将3周龄雌性BALB/c分为4组，分别为:空白对照组，抗生素组，RSV感染组及RSV感染十抗生素组。感染后第8天及第15天利用流式细胞术对各组小鼠肺部Treg细胞进行检测。感染后第15天分别利用RT-PCR及ELISA对肺部Foxp3 mRNA的表达和BALF中IL-10及TGF-β的水平进行检测。
　　 结果：RSV感染后第8天及第15天，肺部Treg细胞比例上调。而在RSV感染后第15天，抗生素致咽部菌群失调抑制了肺部Treg细胞的增殖。仅单独使用抗生素也会降低肺部Treg细胞的比例。在RSV感染后第15天，肺部Foxp3mRNA的表达上升;而咽部菌群失调抑制RSV感染后肺部Foxp3mRNA的表达。感染后第15天，RSV感染组BALF中IL-10的水平上升，而RSV感染+抗生素组BALF中的IL-10水平上升更明显。各组BALF中TGF-β的水平未见明显差异。
　　 结论：RSV感染诱导肺部Treg细胞的增殖，而抗生素致咽部菌群失调会抑制RSV感染后肺部Treg细胞的增殖。
　　 第三部分抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部CD11c+细胞的影响
　　 目的：探讨抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部CD11c+细胞的影响。
　　 方法：将3周龄雌性BALB/c分为3组，分别为:空白对照组，RSV感染组及RSV感染十抗生素组。感染后第8天利用流式细胞术对各组小鼠肺部CD11c+细胞的MHC-Ⅱ、CD80、CD86及CD40进行检测。
　　 结果：RSV感染后第8天，肺部CD11c+细胞上MHC-Ⅱ、CD80、CD86及CD40阳性细胞比例上调，MHC-Ⅱ和CD80的平均荧光强度增强，细胞趋于成熟状态。而在RSV感染+抗生素组，CD11c+细胞上MHC-Ⅱ和CD80的表达降低，接近于空白对照组水平。
　　 结论：RSV感染诱导肺部CD11c+细胞的成熟，而抗生素致咽部菌群失调会抑制RSV感染后肺部CD11c+细胞的成熟。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

第一部分 抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后气道炎症及气道高反应的影响

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

参考文献

第二部分 抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部Treg细胞的影响

1 材料与方法

2．结果

3．讨论

参考文献

第三部分 抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部CD11c+细胞的影响

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

参考文献

结论

综述 调节性T细胞分子标记及作用机制的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文