原花青素和单宁酸对牙本质敏感模型作用的研究

摘要

背景：牙本质敏感是临床上患者就诊的常见主诉;发病机制尚不明确;最被广泛接受的是流体动力学说。基于该学说;防治牙本质敏感的途径包括降低神经兴奋性和封闭牙本质小管。药物治疗仍是防治牙本质敏感的常用方法;疗效持久性一直是关注的重点。我国具有丰富的中草药资源;成为开发和筛选药物的重要宝库。 葡萄籽提取物原花青素和五倍子有效成分单宁酸均属于多酚化合物。在口腔领域的应用中;已证实原花青素具有偶联胶原纤维增强粘接强度;抑菌;促进龋损再矿化的作用;五倍子单宁酸具有抑制胶原降解;抑菌;促进早期龋再矿化;封闭牙本质小管的作用。但关于原花青素和单宁酸治疗牙本质敏感方面的研究罕见。 目前治疗牙本质敏感的体外研究中;以牙本质小管封闭方面为重。牙本质小管通透性检测和SEM图像分析可以定量/半定量评估牙本质小管封闭效果。EDXXRD和ART/FTIR检测可以定性分析其封闭机制。两者结合用于评价原花青素和单宁酸对牙本质小管封闭效果的研究尚未有报道。 目的：本实验拟通过构建牙本质敏感体外研究模型;应用上述定量/半定量或定性分析手段;评价原花青素和单宁酸对牙本质小管敏感模型的作用;为临床防治牙本质敏感提供一定参考依据。 方法： 1.流体动力学装置的构建:参考Pashley提出的液压通透装置;以此为基础进行改良。装置由5部分构成;氮气提供气压;连接储液腔;将气压转化成液压;用压力表对液压进行检测;水平连接毛细玻璃管来测量小气泡移动的距离;连接注射器;用于注入小气泡;最后连接分裂腔;内部为牙本质片提供直径1cm的空间。各连接处用α-氰基丙烯酸乙酯连接;进行密封性检测;以及重复性和再现性分析。 2.原花青素和单宁酸对牙本质敏感模型的作用:取牛下颌中切牙130个;分别制成牙本质片;随机分成13组（n=10）;为（4、8、16、32、64、128mg/ml）原花青素组;（4、8、16、32、64、128mg/ml）单宁酸组及空白对照组。原花青素和单宁酸组每日药物处理3次;每次5min;其余时间使用再矿化液处理;空白对照组直接置于再矿化液中;连续处理7d。原花青素和单宁酸组处理前后测量牙本质通透率评价牙本质小管封闭情况。用SEM观察和图像分析软件量化牙本质小管的封闭效果。 3.原花青素和单宁酸封闭牙本质小管的作用机制的初步探讨：18个牙本质片;分成3组（n=6）;为原花青素组、单宁酸组及空白对照组。原花青素和单宁酸组每日药物处理3次;每次5min;其余时间使用再矿化液处理;空白对照组直接置于再矿化液中;共处理7d。7d后;用SEM观察牙本质表面形态;EDX分析牙本质表面元素变化;XRD检测分析晶体物相变化;以及ATR-FTIR检测定性分析牙本质表面结构变化。 结果： 1.本研究根据Pashley提出的分裂腔法进行改良;成功构建流体动力学装置;检测其封闭性能和重复性再现性能良好。 2.在本实验条件下;通过牙本质通透率和图像定量分析;发现原花青素和单宁酸具有封闭牙本质小管的作用。 3.原花青素和单宁酸处理后;牙本质表面和小管内均有沉淀物产生。EDX显示该沉淀物含有Ca、P元素;XRD提示其为类羟基磷灰石。ATR-FTIR显示原花青素和单宁酸与牙本质胶原纤维有相互作用。 结论：本研究通过原花青素和单宁酸作用于牙本质敏感模型;应用定量/半定量和定性分析手段;发现原花青素和单宁酸均有封闭牙本质小管的作用。且在牙本质表面有类似HAP生成物产生;并与牙本质胶原相互作用有关。

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