高脂动物模型的建立与甲基原薯蓣皂苷对血脂影响的初步研究

摘要

[目的]
　　动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是大多数心脑血管疾病发生的早期原因，其中血脂的升高与紊乱是引起动脉粥样硬化的重要危险因素。长爪沙鼠的脂质代谢与人类相似，被认为研究脂质代谢最好的动物模型。研究发现甲基原薯蓣皂苷(Methyl protodioscin，MPD)可通过调节脂质成分调节胆固醇的水平，促进细胞内胆固醇的流出。本实验在前期研究基础上，拟摸索建立不同的高脂血症动物模型，初步研究MPD对实验动物血症的影响。
　　[方法]
　　1.采用颌下静脉采血法采集血液，建立一种新型采血方法。
　　2.沙鼠高脂动物模型的建立。沙鼠30只，雌雄各半，随机分成5组，每组6只，分别给予不同的饲料喂养。正常对照组给予普通饲料，高脂模型组给予以下四种不同配方高脂饲料:配方一(H1):99％基础饲料+1％的胆固醇;配方二(H2):89％基础饲料+1％的胆固醇+10％的猪油;配方三(H3):79％基础饲料+1％的胆固醇+20％的猪油;配方四(H4):89％基础饲料+1％的胆固醇+9.3％的猪油+0.5％胆酸盐+0.2％丙基硫氧嘧啶。连续喂养12周，每隔2周测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。
　　3.大鼠高脂动物模型的建立。大鼠30只，雄性，随机分成5组，每组6只，分别给予不同的饲料喂养。分组情况、喂养方式与沙鼠组相同。连续喂养12周，每隔2周测定血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平。
　　4.MPD对高脂模型动物血脂的影响。沙鼠15只，雌雄各半，随机分成3组，每组5只，分别为正常饲料组（给予普通饲料喂养）、高脂模型组（给予89％基础饲料+1％的胆固醇+10％的猪油喂养）和给药组（给予89％基础饲料+1％的胆固醇+10％的猪油喂养）。给药组在高脂饲料喂养4周后，开始给予MPD以50mg/kg/d的剂量再灌胃4周，用全自动生化分析仪检测血脂变化。
　　[结果]
　　1.颌下静脉采血法:成功采集沙鼠静脉血，沙鼠采血的死亡率较低，采血量较多，重复性较好，对沙鼠的损伤较小。
　　2.血脂四项分析沙鼠高脂动物模型的建立。测定结果显示，不同饲料喂养后，沙鼠血清总胆固醇(TC)呈明显上升趋势，其中H3配方在第8周时达最高值20.57mmol/L，与正常对照组相比具有显著性差异（P＜0.01）。血清甘油三酯(TG)水平只有H2配方喂养后显著升高，H3配方沙鼠在10～12周时TG开始升高，但在第12周时仅高出正常组7.01 mmol/L。4种配方饲料喂养后，血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均升高。血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平从第2周开始均显著升高，其中H3与H4配方LDL升高最为明显(P＜0.01)，H3配方沙鼠在第8周时其含量达到16.06 mmol/L。正常对照组肝脏颜色深红、质地柔软、有弹性，结构清晰完整;而给予不同配方饲料的高脂模型组大鼠肝脏颜色变淡，出现肝肿大，包膜紧张，肝脏呈现不同程度的脂肪变性。
　　3.血脂四项分析大鼠高脂动物模型的建立。不同高脂饲料喂养12周后，大鼠血清TC水平只有H4配方组上升。血清TG水平在喂养后第2周，H1、H2、H3配方组开始上升，但至12周时与正常对照组相比，差异不显著（P＞0.05）。用配方H4喂养后，血清HDL-C和LDL-C水平均升高（P＜0.05）。高脂饲料喂养后，肝脏颜色偏红、有弹性、结构清晰完整。
　　4.测定MPD对血脂的影响。测定结果显示，给予MPD2周后，沙鼠血清TC水平已降至3.89mm/L，4周后TC水平与给药前相比显著降低(P＜0.05)。血清TG水平给予MPD2周后，比正常对照组低0.24mmol/L。给予MPD4周后，与对照组相比，血清HDL-C水平变化不明显，而LDL-C显著降低(P＜0.05)。
　　[结论]
　　选择89％基础饲料+1％胆固醇+10％猪油的高脂饲料喂养蒙古长爪沙鼠，成功建立高脂动物模型。利用甲基原薯蓣皂苷，初步验证了动物模型的可行性。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 一种新型采血方法的建立

2．1 实验材料

2．2 实验方法

2．3 实验结果

2．4 实验讨论

3 沙鼠高脂动物模型的建立

3．1 实验材料

3．2 实验方法

3．3 实验结果

3．4 实验讨论

4 大鼠高脂动物模型的建立

4．1 实验材料

4．2 实验方法

4．3 实验结果

4．4 实验讨论

5 MPD对高脂动物模型血脂作用的初步探讨

5．1 实验材料

5．2 实验方法

5．3 实验结果

5．4 实验讨论

6 小结

参考文献

综述 中药活性成分薯蓣皂苷与代谢综合征的研究进展

致谢

附录

在读硕士期间的科研情况