晚期糖基化终产物修饰的β微球蛋白对人关节滑膜细胞病理生物学作用的研究

摘要

目的:该课题研究了AGE-β<,2>m对滑膜细胞的病理生物学作用,为阐明DRA时骨、关节损害机制,为临床预防和治疗DRA提供理论依据.方法:分离线性化并在体外培养人关节滑膜细胞,用放射性配体-受体结合分析法检测细胞表面的晚期糖基化终产物结合蛋白的表达,并分析TNF-α、IL-1β和AGE-HSA对其表达的调节.用ELISA法检测AGE-<,2>m刺激下HSCs培养上清的MCP-1,以及抗RAGE抗体(α-RAGE)对其抑制作用;用Northern Blot法测定HSCs MCP-1mRNA的表达;用双室法行单核细胞趋化实验.用ELISA法检测HSCs培养上清TNF-α和IL-1β,以及α-RAGE对其抑制作用;用放射免疫测定法检测HSCs培养上清的透明质酸(HA)、层粘蛋白和Ⅲ型前胶原,用Western Blot法测定分泌的HA分子量.结论:我们首次证实,人类关节固有细胞—滑膜细胞表达对AGE特异的受体,RAGE介导了AGE修饰蛋白引起的关节滑膜细胞的病理生物学改变.因此,DRA时淀粉样沉积中的AGE-β<,2>m能够通过影响关节组织细胞的功能,直接引起骨、关节组织的炎症反应和损伤.

目录

缩略语词汇表

前言

第一部分AGE修饰蛋白的制备和人滑膜细胞的培养鉴定

材料与方法

结果

图表

第二部分人关节滑膜细胞晚期糖基化终产物结合蛋白的表达及其调节

材料与方法

结果

讨论

图表

第三部分晚期糖基化终产物修饰的β2微球蛋白刺激人关节滑膜细胞分泌趋化因子

材料与方法

结果

讨论

图表

第四部分晚期糖基化终产物修饰的β2微球蛋白刺激人关节滑膜细胞分泌促炎症细胞因子

材料与方法

结果

讨论

图表

第五部分晚期糖基化终产物修饰的β2微球蛋白对人关节滑膜细胞分泌透明质酸和细胞外基质的影响

材料与方法

结果

讨论

图表

小结

致谢

参考文献