反式白藜芦醇及白藜芦醇苷在大鼠体内的药代动力学研究

摘要

1、血浆中反式白藜芦醇(t-Res)及反式白藜芦醇苷(t-PD)的高效液相色谱法(HPLC)建立及其在大鼠体内的药代动力学研究 目的：建立大鼠血浆中t-Res及t-PD浓度的HPLC测定方法，研究比较t-Res及t-PD在大鼠体内的药代动力学行为。 方法：取Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组，每组65只，根据大鼠灌胃给予t-Res(29.2、58.5、116.9mg·kg-1)后，在预定时间点(给药前及给药后0.083、0.167、0.25、0.333、0.417、0.5、0.667、0.833、1、1.5、2、2.5h)眼眶取血，分离血浆，微孔滤膜滤过，20μl进样。色谱柱为HypersilBDSC18柱(200mm×4.0mm,5μm)；流动相：乙腈-1％冰醋酸溶液(25∶75)；流速：1.0ml·min-1；检测波长：306nm。记录峰面积，按外标法以峰面积计算血药浓度，采用DAS2.0药代动力学程序软件分析药物浓度－时间(C-T)曲线，进行自动拟合处理，选择最佳房室模型参数，并给出非房室模型(统计矩)参数。 大鼠灌胃给予t-PD的剂量分别为50mg·kg-1、100mg·kg-1、200mg·kg-1，样品前处理方法同前，流动相：乙腈-1％冰醋酸溶液(22∶78)；流速：0.8ml·min-1；检测波长：306nm。 结果：大鼠血浆中t-Res在0.125～2.5μg·ml-1范围内线性关系良好，回归方程为A=0.4708+25.5397C(n=6)，相关系数0.9994；大鼠血浆中t-PD在0.013～2.525μg·ml-1范围内线性关系良好，回归方程为R=4.2650+17.5689C(n=7)，相关系数0.9998。血浆中t-Res的最低检测浓度为0.0625μg·ml-1，t-PD最低检测浓度为0.006μg·ml-1。t-Res在高、中、低三种浓度的回收率分别是104.26％、99.45％、96.35％(n=5)；t-PD在高、中、低三种浓度的回收率分别是98.83％、102.21％、95.42％(n=5)。i.g.给药的C-T曲线数学模型较为复杂，因此同时采用非房室模型进行拟合。在等摩尔剂量给药条件下，反式白藜芦醇原形药物进入体内摩尔总量(AUCt-Res)大于反式白藜芦醇苷原形药物(AUCt-PD)。 结论：采用本文建立的生物样品预处理方法和HPLC法研究SD大鼠灌胃t-Res或t-PD后的药代动力学过程，生物样品预处理方法回收率高，色谱分离选择性好。本法的准确度、精密度、灵敏度、专属性和定量线性范围均达到体内药物分析的要求。t-Res与t-PD灌胃给药后，吸收迅速，血药浓度消除较快，个体差异较大。 2、t-Res及t-PD对大鼠肝微粒体P450酶系的影响 目的：研究比较t-Res及t-PD对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响。 方法：等摩尔的t-Res(116.9mg·kg-1)及t-PD(200mg·kg-1)灌胃给药SD大鼠，空白组给予等容量的1％羧甲基纤维素钠，每日1次，14天后，断头处死，用钙沉淀法制备大鼠肝微粒体，用考马斯亮蓝法测定蛋白浓度，采用紫外和荧光分光光度计的方法建立肝微粒体中细胞色素P450、氨基比林N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶和7-乙氧基-3-异吩噁唑酮脱烃酶的检测方法，并检测其活性。用SPSS13.0软件进行单因素方差分析统计。 结果：测定氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶活性的甲醛标准曲线，在0.05～0.5mmol·L-1浓度范围内与OD值有良好的线性关系，最低检测限为0.05mmol·L-1。线性方程为y=2.2768x+0.0015(r=0.9977，n=6)。测定7-乙氧基-3-异吩噁唑酮脱烃酶的resorufin标准曲线方程为y=1.9962x+1.4741(r=0.9997，n=6)。检测范围为10～200mmol·L-1，最低检测限为10mmol·L-1。t-Res组及t-PD组对细胞色素P450、氨基比林N-脱甲基酶、红霉素-N-脱甲基酶和7-乙氧基-3-异吩噁唑酮脱烃酶的活性有显著性抑制作用，t-Res组与t-PD组两者之间比较没有统计学意义。结论：紫外和荧光分光光度的方法测定大鼠肝微粒体细胞色素中四种酶的含量及活性的方法灵敏可靠，重现性较好。t-Res及t-PD对CYP450酶系有抑制作用，但两者之间比较无显著性差异。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一章血浆中反式白藜芦醇及白藜芦醇苷的HPLC测定方法的建立

第二章 反式白藜芦醇及白藜芦醇苷在大鼠体内的药代动力学研究

第三章 反式白藜芦醇及白藜芦醇苷对大鼠肝微粒体P450酶系的影响

结论

参考文献

英文缩略词表

成果（在读期间发表的论文）

致谢

综述 白藜芦醇的研究进展

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