转基因番木瓜PCR检测技术的研究

摘要

我国于2006年12月批准首例转基因番木瓜商业化应用，为了遵循转基因食品的相关标识法规，保障消费者的合法权益，对转基因番木瓜及其加工产品进行快速有效的检测就颇显重要。本论文以现行的有效检测手段—PCR技术对抗环斑病毒转基因番木瓜开展了定性和定量检测的研究。此外，论文就影响转基因番木瓜检测的一些因素进行了探讨，如不同提取方法对转基因番木瓜基因组DNA提取效果的影响，番木瓜不同组织基因组DNA提取效果的比较等。 为达到对转基因番木瓜进行全面、快速检测的目的，本研究设计了一整套特异性很强的引物和探针，优化反应条件后，建立了对转基因番木瓜筛选、基因特异性的定性以及定量PCR检测体系：对两种外源抗环斑病毒基因(RP和CP)，三种筛选基因(35S，NOS和NPT-Ⅱ)和一种内源基因(Papain)进行定性PCR检测，检测体系特异性强，灵敏度高；并对．RP、CP和Papain基因进行了SYBR Green IPCR和实时定量PCR检测，首次成功建立了高效、稳定的实时定量PCR检测体系。 论文研究结果还表明，对所选Papain基因的检测特异性强、稳定性良好，且该基因是种间特异性、种内非特异性基因，有望在今后的转基因番木瓜定量检测中发挥更加重要的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

1.1研究背景

1.2主要研究对象

1.3转基因作物检测现状

1.4本研究的主要工作

第二章材料与方法

2.1材料与试剂

2.2主要仪器设备

2.3实验方法

第三章结果与分析

3.1基因组DNA的提取结果

3.2传统PCR扩增结果

3.3 SYBR Green I PCR扩增结果

3.4 TaqMan实时定量PCR扩增结果

第四章讨论

4.1番木瓜基因组DNA的提取效果

4.2番木瓜内标准基因确立的重要性

4.3转基因番木瓜的定性PCR检测

4.4转基因番木瓜的定量PCR检测

本论文主要结论

参考文献

致谢

附录

个人简历