肌球蛋白重链基因MyHC与中国地方鸡肌肉品质之间的相关研究

摘要

清远麻鸡以其体型小、皮下和肌间脂肪发达、皮薄骨软而著名，现在已经成为我国活鸡出口的小型肉用名产鸡之一；鲁两斗鸡属玩赏型，但是体型高达魁梧，体质健壮，体躯长，类似鸵鸟身，尤其是胸腿肌发达，具有良好的胸肌腿肌产量，在我国地方肉鸡生产中常被用作杂交父本。本研究选用鲁西斗鸡和清远麻鸡作为主要的实验材料，对其进行了骨骼肌细胞类型分析，以及生长和肉质测定，并检测了相关基因的表达情况。 实验以处于生长曲线拐点处的10只青年鲁西斗鸡和15只青年清远麻鸡为研究对象，采集了体重、胫骨长数据和胸浅肌、腓肠肌的肌肉样品。在个体水平，测定了胸浅肌、腓肠肌的pH值、失水率、剪切力；在组织水平，对胸浅肌腓肠肌分别冰冻切片，SDH染色结合Image Pro-plus软件鉴定分析组织中的红肌纤维、中间型纤维、白肌纤维及获得其参数；在分子角度，提取总RNA，以GAPDH为对照，通过RT-PCR定性地鉴定SMl、M2、U、IMFH的表达，利用Real-TimePCR对不同品种不同组织中四个基因的表达进行了量化测定。 SDH染色后统计分析，鲁西斗鸡胸浅肌中的中间型纤维和红肌纤维表现出了相同的变化趋势，肌纤维密度和数量比例均低于清远麻鸡的，但是肌纤维直径大于清远麻鸡直径。为了更进一步分析不同组织类型对肌纤维参数的影响，将肌肉组织分为了含有红肌型、中间型、白肌型的RMW型，含有中间型和白肌型纤维的MW型以及仅含白肌纤维的W型。鲁西斗鸡胸浅肌中含有33％的RMW型肌肉组织，清远麻鸡中还有5.3％的RMW型胸浅肌，这与胸浅肌中较高比例红肌纤维有关，RMW型的鲁西斗鸡胸浅肌的剪切力要小于相同类型胸浅肌的清远麻鸡。性别效应不显著。肉质品质显示，清远麻鸡胸浅肌的肉质嫩度与鲁西斗鸡的胸浅肌的肉质嫩度差异不显著。慢缩型肌球蛋白SMl、慢缩型肌球蛋白SM2、快缩型U、肌内脂肪基因IMFH四个基因用于评定不同品种不同组织不同组织类型间的基因表达差异。定量PCR数据统计显示，在不同组织类型中，RMW的含量越多，红肌纤维数量越多，SM2的表达量越高；SM1与SM2的表达具有相同的趋势，但是表达量要比后者低一些，SMl的表达量与红肌纤维的直径显著正相关，即红肌纤维的直径越大，SMl的表达量越高。基因U的表达量极低，与肉质几乎无相关性，所以不予考虑。肌内脂肪基因IMFH在胸浅肌和腓肠肌中的表达趋势与SM2的表达趋势相似，且与SM2极显著相关(P<0.01)。这也从侧面说明了红肌纤维数量越多肉质越嫩的另一个原因，肌内脂肪含量较高。 改进后的SDH染色借助灰度值范围，可有效鉴别三种纤维类型，红肌纤维在品种间存在差异。目标基因SMl、SM2和IMFH在含有红肌纤维的胸肌中也表现出了品种问的差异，可以作为红肌纤维分子标记的候选基因做进一步研究。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

第一章文献综述

第二章试验材料与方法

2.1实验器材

2.2实验方法

第三章结果与分析

3.1 SDH染色鉴别斗鸡和麻鸡的红肌纤维、中间型纤维、白肌纤维

3.2生长性状在不同品种不同性别以及肌肉组织类型中的差异

3.3肉质性状在不同品种不同性别以及肌肉组织类型中的差异

3.4反转录PCR定性分析胸肌腿肌中目标基因的表达

3.5胸肌腿肌中目标基因SM1、SM2、U、IMFH表达的定量分析

第四章讨论

4.1鲁西斗鸡、清远麻鸡骨骼肌的纤维类型

4.2清远麻鸡、鲁西斗鸡之间的肌纤维类型的比较

4.3不同品种不同组织间目标基因的表达差异

第五章结论

参考文献

致谢

个人简历