ENU对草鱼精子的诱变及在F1代中的突变效率

摘要

ENU诱变是近年来发展起来的获得模式生物功能突变体的新手段,在养殖鱼类的遗传改良方面也具有潜在的发展前景.研究显示,以0～10 mmol等不同浓度的ENU溶液处理草鱼精子45 min,与野生型雌鱼受精产生的胚胎在体节期的畸形率分别为3.1％～91.3％,胚胎畸形率与ENU浓度成正比;正常鱼苗的出苗率分别为93.1％～4.4％,与ENU浓度成反比.最后选用1 mmol浓度ENU溶液处理精子,受精后产生的子代的正常率大约为50％,这些子代在1龄阶段生长差异极大,产生了一定比例发育正常、快速生长的个体;提取15尾1+龄诱变F1子代的基因组DNA,对6个生长发育通路相关基因igf-2a、igf-2b、mstn1、mstn-2、fst-1和fst-2的部分阅读框进行基因组DNA的PCR扩增、克隆和测序,结果显示,ENU主要诱变基因组DNA产生GC到AT或AT到GC的点突变,可造成密码子的无义突变、错义突变和同义突变,ENU对上述6个基因的平均诱变率为0.41％.这些结果表明,ENU溶液浸泡精子可在草鱼中实现高效诱变,在将来的功能基因组研究和诱变育种领域具有潜在的应用前景.