单酰基甘油酰基转移酶2是一种四聚体酶可以特异性的与二酰基甘油酰基转移酶1形成异源二聚体

摘要

目的:单酰基甘油酰基转移酶2(Monoacylglycerol acyltransferases,MGAT2)和二酰基甘油酰基转移酶1(Diacylglycerol acyltransferases,DGAT1)是介导小肠脂质吸收并催化甘油三酯合成的两个连续步骤中的两个重要的酰基转移酶,在脂肪进入小肠绒毛细胞被吸收的过程中发挥着重要的作用.本研究旨在探讨MGAT2和DGAT1相互作用关系.rn 方法:通过非变性SDS-PAGE的方法检测MAGT2自聚体的形成,通过在COS-7中共表达MGAT2、DGAT1和DGAT2检测其相互作用关系,并通过构建序列删除质粒研究DGAT1和MGAT2相互作用的位点,探讨其功能.rn 结果:研究表明,MGAT2酶可以形成同源二聚体和同源四聚体.在SDS-PAGE胶上,除了可以检测到依据其氨基酸序列形成38kDa的MGAT2单体外,还可以在不使用还原剂和热变性的情况下检测到76kDa的MGAT2二聚体.并且这个76kDa的MGAT2二聚体条带随着蛋白交联剂的加入而变亮.同时,在SDS-PAE胶的152kDa处的MGAT2四聚体条带也可以随着蛋白交联剂的加入而成剂量变化.同样的,DGAT1也可以在非变性条件下形成同源自聚体.与此相反,MGAT2与DGAT2共同表达于COS-7细胞中时,并不与其形成异源二聚体,尽管这二者在序列上有高度的同源性.再次通过删除DGAT1序列表明其N端的35～80个氨基酸可以和MGAT2序列相互作用.最后,共表达MGAT2和DGAT1在COS-7细胞中可以显著地提高细胞的脂质合成能力,表明形成二聚体的功能显著性.rn 结论:MGAT2和DGAT1可能是甘油三酯酶复合体的一部分.本研究为脂肪吸收过程中的关键酶之间的相互作用提供了直接的分子依据.