高温放线菌Thermoactinomyces sp.CDF芽胞表面蛋白酶的突变分析

摘要

本研究在结构模拟分析的基础上，通过定点突变的方法，将其中某些带电荷氮基酸残基突变为不带电荷的亲水性氨基酸残基。结果显示，在弱碱性条件下，一些突变体活性有提高，稳定性没有改变。在高碱性条件下，E83Q，E187Q，E264Q突变体活性有所提高，其中E83Q和E264Q突变体稳定性有所下降。突变体E92Q在pH8.0和11.0条件下稳定均显著下降，表明该位点对维持CDF蛋白酶分子结构稳定性有重要作用。通过对酶分子表面电势的分析，同非碱性枯草杆菌蛋白酶相比，蛋白酶CDF具有高度的碱性表面，与其分子表面具有大量的精氨酸有关。