有机磷水解酶的芽胞表面展示技术研究

摘要

有机磷毒剂和农药具有强烈的神经毒性,对人体和环境造成损害.有机磷水解酶(Organophosphorus hydrolase,OPH)可催化有机磷化合物水解,但贮存稳定性不高,在复杂条件下,酶的活性降低.枯草芽胞杆菌芽胞表面展示技术能将外源蛋白展示在芽胞表面,提升外源蛋白的贮存稳定性,保持生物活性.但有关芽胞表面展示OPH的相关技术研究还未有报道.本研究通过免疫印迹和免疫荧光实验证明,芽胞中的OPH成功展示在芽胞的表面;经活性检测结果证实,通过重组菌株可获得具有水解有机磷化合物活性的重组芽胞,水解对氧磷的比活力为15.81U/mg.由此表明,有机磷水解酶-锚定蛋白-枯草芽胞杆菌重组系统构建成功,对研发具有实用性的功能芽胞生物检测器起到了积极地推动作用.